[发明专利]两种菌协同降解多环芳烃的方法

摘要

两种菌协同降解多环芳烃的方法，涉及一种多环芳烃的降解方法，细菌培养基Ⅰ：牛肉膏5g，蛋白胨5g，葡萄糖5g，去离子水1L，pH7.2；真菌培养基Ⅰ：把马铃薯洗净去皮，取200克切成小块，加水1000毫升，煮沸半小时后，用纱布过滤，补足水分；在滤液中加入蔗糖20克补足水分至1000毫升，分装，灭菌，备用；平pH自然；在150ml三角瓶中加入30ml培养液，灭菌冷却至室温后培养；再将PAHs与菌种混合培养：该方法是将一种真菌和一种细菌同时投放到含有多环芳烃的废水中，为多环芳烃的降解提供了一种更有效的方法，该方法降解效率高、降解程度大。

主权项

两种菌协同降解多环芳烃的方法，其特征在于，该方法包括如下过程：a.菌类的培养：包括菌种的分离、鉴定和菌种的培养，其菌种的培养为： 细菌培养基Ⅰ： 牛肉膏 5 g，蛋白胨 5 g，葡萄糖 5 g，去离子水 1L，pH 7.2； 如果灌制斜面，则加入 2%琼脂；细菌培养基Ⅱ：MgSO4·7H2O 0.2 g，CaCl2·2H2O 0.01 g，Fe SO4·7H2O 0.01 g，KH2PO4    0.4 g，Na2HPO4·12H2O    0.6 g ，MnSO4·H2O     0.02 g, NH4NO3 1 g，葡萄糖 0.5 g，去离子水 1L, pH 7.0～7.6；真菌培养基Ⅰ：把马铃薯洗净去皮，取 200 克切成小块，加水 1000 毫升， 煮沸半小时后，用纱布过滤，补足水分；在滤液中加入蔗 糖 20 克补足水分至 1000 毫升，分装，灭菌，备用；如果 灌制斜面，则加入 2%琼脂；PH 自然；真菌培养基Ⅱ：(g/L): NH4NO3, 1; MgSO4·7H2O, 0.2; CaCl2·2H2O, 0.01; FeSO4·7H2O, 0.01; KH2PO4, 0.4; Na2HPO4·12H2O, 0.6; MnSO4·H2O, 0.02; 葡萄糖, 0.5；在 150ml三角瓶中加入 30ml培养液，在压力为 1.01325×105 Pa灭菌 30 min， 冷却至室温后，将保存于斜面的不同菌种分别接至上述细菌培养基Ⅰ和真菌培养 基Ⅰ，培养 12‑20h后，在无菌室分别对应地转接到细菌培养基Ⅱ样品中和真菌培 养基Ⅱ样品中；再将PAHs与菌种混合培养：对降解菌制备完成之后在进行实验之前将降解的多环芳烃和菌类混合4周时间，增加菌对这种多环芳烃毒性的耐受度；b. 降解实验：实验设置三个方案，目的是做一比较来验证结果的正确性，方案一：将要降解某一个多环芳烃作为唯一的碳源，加入培养好的真菌，调节适度的pH值，入摇床适宜条件下降解培养，在0, 2, 4, 6, 8, 10d 分别取样；方案二：将要降解某一个多环芳烃作为唯一的碳源，加入培养好的细菌，调节pH值，入摇床降解培养，在0, 2, 4, 6, 8, 10d 分别取样；方案三：除了加入的是50%真菌和50%的细菌混合菌外，其他处理方法同上；c. 结果处理：对上述的样品首先二氯甲烷萃取处理，紫外分光光度计进行测定。