[发明专利]一种检测日本乙型脑炎病毒的RT-LAMP可视化试剂盒及其应用有效
申请号: | 201110416855.9 | 申请日: | 2011-12-13 |
公开(公告)号: | CN102399909A | 公开(公告)日: | 2012-04-04 |
发明(设计)人: | 陈金顶;刘薇;张学涛;赵明秋;乔进平;王波;勾红潮 | 申请(专利权)人: | 华南农业大学 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68 |
代理公司: | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人: | 杨晓松 |
地址: | 510642 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种检测日本乙型脑炎病毒的RT-LAMP可视化试剂盒及其应用。该可视化试剂盒包含引物组和显色物质;引物为如SEQ ID NO:1~4所示的序列,显色物质为钙黄绿素和氯化锰。该试剂盒的使用方法如下:首先配制RT-LAMP反应体系,包含AMV逆转录酶、1倍反应缓冲液、链置换DNA聚合酶、dNTP混合物、甜菜碱、钙黄绿素、氯化锰、MgSO4、FIP引物、BIP引物组、F3引物、B3引物以及待测样品RNA;接着将反应体系于61~65℃恒温反应,灭活;通过自然光照下或紫外光下判读结果或是二者结合判读:在自然光下反应产物为绿色,说明待测样品含有日本乙型脑炎病毒;在紫外光下反应产物呈现明显的绿色荧光,说明待测样品含有日本乙型脑炎病毒。 | ||
搜索关键词: | 一种 检测 日本 脑炎 病毒 rt lamp 可视化 试剂盒 及其 应用 | ||
【主权项】:
一种检测日本乙型脑炎病毒的RT‑LAMP可视化试剂盒,其特征在于包含引物组和显色物质;所述的引物组如下所示:F3:5’‑GGGCAACGGATGTGGATTT‑3’;B3:5’‑GTTTGAGGGCTACCGAAGGA‑3’;FIP:5’‑TGTTTTCTGGCTGGATTGTTCTCCTTTGGGAAGGGAAGCATTGACAC‑3’;BIP:5’‑TTTTGTGCATGGAACCACCACTTCTTTGTAAACTTTGCCGCCTGGG‑3’;所述的显色物质为钙黄绿素和氯化锰。
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