[发明专利]生产苹果酸的方法

摘要

本发明公开了一种生产苹果酸的方法，具体步骤为：将出芽短梗霉接种于种子培养基，温度为23-30℃震荡培养，得活化种子液；将所得活化种子液接种于发酵培养基，温度为23-30℃震荡培养144小时以上，固液分离，收集液体，得发酵液；将所得发酵液用乙醇沉淀，固液分离，收集沉淀，得聚苹果酸；将所得聚苹果酸进行酸水解，得水解液；最后将所得水解液浓缩，结晶，制得苹果酸；本发明的生产苹果酸的方法工艺步骤简单，苹果酸产率高，适合于大规模生产。

主权项

生产苹果酸的方法，其特征在于，具体步骤为：a．种子活化将出芽短梗霉（Aureobasidium pullans）NRRL Y‑2311‑1接种于种子培养基，温度为23‑30℃震荡培养，得活化种子液；所述种子培养基为葡萄糖40‑100 g/L、NH4NO31‑5 g/L、KH2PO4 0.005‑0.3g/L、ZnSO4 0.005‑0.3g/L、MgSO4 0.005‑0.3g/L、玉米浆0.05‑3 g/L和CaCO3 10‑50 g/L；b. 发酵将步骤a所得活化种子液接种于发酵培养基，温度为23‑30℃震荡培养144 小时以上，固液分离，收集液体，得发酵液；所述发酵培养基为糖80‑120g/L、NH4NO3 1‑5g/L、KH2PO4 0.005‑0.3g/L、ZnSO4 0.005‑0.3g/L、MgSO4 0.005‑0.3g/L、玉米浆0.05‑3g/L和CaCO3 10‑50 g/L；所述糖为葡萄糖、木糖、玉米秸秆水解液或木质纤维素水解液中的至少一种；所述玉米秸秆水解液的制备方法是取玉米秸秆，粉碎，加水，用酸调节pH至2.5，加热至100℃充分水解，然后用碱中和，加入纤维素酶和半纤维素酶，50℃恒温水解，过滤，收集滤液，即得玉米秸秆水解液；所述木质纤维素水解液的制备方法是取木质纤维，粉碎，用质量分数为7%的硫酸浸泡，再加热至160‑200℃充分水解，然后用碱中和，剩余残渣再用质量分数为2%的硫酸在温度为180‑240℃充分水解，过滤，收集滤液，即得木质纤维素水解液；c. 醇沉将步骤b所得发酵液用乙醇沉淀，固液分离，收集沉淀，得聚苹果酸；d. 水解将步骤c所得聚苹果酸进行酸水解，得水解液；e．浓缩结晶将步骤d所得水解液浓缩，结晶，得苹果酸。