[发明专利]几丁质酶的四膜虫表达载体及其在表达几丁质酶中的应用

摘要

本发明公开了一种几丁质酶的四膜虫表达载体及其在表达几丁质酶中的应用。本发明提供了一种表达盒，包括序列1自5’末端第9至1126位核苷酸所示HSP70-2基因启动子、序列2所示几丁质酶的编码基因和序列1自5’末端第3835至4312位核苷酸所示HSP70-1基因终止信号。本发明还提供了含有所述表达盒的重组质粒。该重组质粒电转到四膜虫后，在巴龙霉素药物筛选作用下，能替换掉四膜虫体内原有的大部分rDNA，使外源基因在四膜虫体内大量倍增，实现目标基因的遗传转化，在热激条件下，HSP70-2强启动子启动CBD3基因的高效表达，而且表达的几丁质酶具有生物活性(能水解几丁质)。综上所述，本发明具有广泛的应用前景。

主权项

DNA片段，自5’至3’方向依次包括HSP70‑2基因启动子、几丁质酶的编码基因和HSP70‑1基因终止信号；所述HSP70‑2基因启动子如序列表的序列1自5’末端第9至1126位核苷酸所示；所述HSP70‑1基因终止信号如序列表的序列1自5’末端第3835至4304位核苷酸所示；所述几丁质酶如序列表的序列2所示。