[发明专利]实时荧光定量PCR检测方法有效
| 申请号： | 201110444695.9 | 申请日： | 2011-12-27 |
| 公开（公告）号： | CN102424852A | 公开（公告）日： | 2012-04-25 |
| 发明（设计）人： | 戴立忠;熊晓燕;邓中平 | 申请（专利权）人： | 戴立忠 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京康信知识产权代理有限责任公司 11240 | 代理人： | 吴贵明 |
| 地址： | 410000 湖南省长沙*** | 国省代码： | 湖南;43 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明提供了一种实时荧光定量PCR检测方法，在常规的PCR检测方法的基础上增加了一个面向目的基因同源区段的增补探针，以发挥类似内标的监测作用。采用该法进行实时荧光PCR能避免假阴性的出现。 | ||
| 搜索关键词： | 实时 荧光 定量 pcr 检测 方法 | ||
【主权项】：
一种实时荧光定量PCR检测方法，包括以下步骤：(1)选取目的基因上的同源保守区段，设计与所述同源保守区段5’端和3’端特异配对的上、下游引物，选取所述同源保守区段中的第一区段，设计与所述第一区段配对的第一探针，所述第一探针的5’端标记第一荧光报告基团；(2)构建所述同源保守区段的竞争性内标，并设计所述竞争性内标的内标探针，所述内标探针的5’端标记所述第二荧光报告基团；(3)在所述同源保守区段上选取与所述第一区段间隔的第二区段，设计与所述第二区段特异互补配对的增补探针；(4)提取纯化样本基因，合成上下游引物、内标基因的质粒、第一探针、内标探针和增补探针后用于对所述样本基因进行实时荧光定量PCR扩增；(5)记录所得荧光信号，判断结果；所述增补探针的5’端标记第二荧光报告基团，所述第二区段和所述第一区段均位于所述上、下游引物之间；其特征在于，所述增补探针的浓度为所述第一探针的浓度的1/2～1/10。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于戴立忠，未经戴立忠许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201110444695.9/，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：甲磺酸左旋尤利沙星晶体及其制备方法和用途
- 下一篇：集装箱数据中心冷却装置
