[发明专利]兔软骨下骨成骨细胞体外扩增培养方法及应用无效
| 申请号： | 201110445679.1 | 申请日： | 2011-12-28 |
| 公开（公告）号： | CN102517250A | 公开（公告）日： | 2012-06-27 |
| 发明（设计）人： | 李秀兰;张杨;郭悦;孙晓雷;张玮;崔丽;冯俊奇 | 申请（专利权）人： | 天津市天津医院 |
| 主分类号： | C12N5/077 | 分类号： | C12N5/077;C12Q1/02 |
| 代理公司： | 天津市杰盈专利代理有限公司 12207 | 代理人： | 王小静 |
| 地址： | 300211 *** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种兔膝关节炎软骨下骨成骨细胞体外扩增培养方法及应用。其培养方法是：首先制作改良Hulth兔关节不稳模型4～6周后无菌手术分离兔膝关节；然后将胫骨平台软骨下骨皮质小骨片经I型胶原酶-EDTA复合酶消化0.5～2小时后接种于血清包被的12孔板内，分次加入培养液培养；骨片贴附7～14天开始有细胞从骨片边缘爬出。所获得的细胞纯度高且增殖能力良好。本发明方法简单易行，获取时间短，获得的细胞成活率高、纯度高，可在短时间内满足大量制备的需要，对研究骨性关节炎发生、发展及其防治骨性关节炎有重要意义。 | ||
| 搜索关键词： | 软骨 下骨成骨 细胞 体外 扩增 培养 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种兔膝关节炎软骨下骨成骨细胞的体外扩增培养方法，其特征在于，包括如下的步骤：1)制作改良Hulth兔关节不稳模型4～6周后，无菌手术分离兔膝关节；2)将胫骨平台软骨下骨皮质区削为小骨片，经I型胶原酶‑EDTA复合酶消化0.5～2小时，I型胶原酶单独消化2次，第1次12‑20小时，第2次1～4小时，弃净消化液；3)将骨片接种于血清包被的12孔板内，分次加入培养液培养，每2天换液，注意手法轻柔，勿使骨片漂起；4)骨片贴附7～14天开始有细胞从骨片边缘爬出，制备出软骨下骨成骨细胞。
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