[发明专利]一种基于组合模具的复杂器官前体的制备方法

摘要

一种基于组合模具的复杂器官前体的制备方法，该方法首先制备细胞基质溶液和合成高分子溶液，一组具有不同通道直径的中间模具分别套在实心多分支内模具外部，将细胞基质溶液灌注到实心多分支内模具与中间模具之间经物理或化学交联形成多层细胞基质层；将外模具套在多层细胞基质层外部，将合成高分子溶液灌注到细胞基质层和外模具之间，用细胞培养液或PBS萃取后形成外支架，去除组合模具即可。本发明可成形含不同细胞基质材料与合成高分子支架的复杂多分支三维结构，克服了组织工程存在的在三维支架中诱导培养细胞需要时间长、细胞分布不均匀，细胞很难渗入到多分支结构中等缺点。

主权项

一种基于组合模具的复杂器官前体的制备方法，其特征在于该方法包括如下步骤进行：1)将不同天然高分子溶液与不同动物体细胞悬浮液按1～9∶9～1体积比混合制成多种细胞基质溶液；天然高分子溶液的质量百分浓度为1％～30％；2)预先设计好实心多分支内模具(1)和一组具有不同直径通道的中间模具(3)，将其中一种中间模具(3)套在实心多分支内模具(1)的外部，将其中一种细胞基质溶液灌注到实心多分支内模具(1)和中间模具(3)之间的缝隙中，采用物理或化学交联方法，使细胞基质溶液中的天然高分子交联，去除中间模具(3)，形成稳定的第一层细胞基质层(2)；3)使用另一种通道直径比第一种大的中间模具(3)套在第一层细胞基质层(2)的外部，将另一种细胞基质溶液灌注到第一层细胞基质层(2)和第二种中间模具(3)之间的缝隙中，采用物理或化学交联方法，使细胞基质溶液中的天然高分子交联，去除中间模具(3)，形成稳定的第二层细胞基质层(4)；4)重复步骤2)与步骤3)，得到含不同动物体细胞的多层细胞基质层结构；5)将合成高分子材料溶于有机溶剂中制成质量百分浓度为1％～30％的合成高分子溶液；6)将预先设计好的外模具(5)套在多层细胞基质层结构外部，将合成高分子溶液灌入多层细胞基质层结构与外模具的缝隙中，用细胞培养液萃取合成高分子溶液中的溶剂，形成外层合成高分子材料层(6)，然后去除外模具(5)与实心多分支内模具(1)，制成多分支及多层结构的复杂组织器官前体。