[发明专利]用于可结晶成熟型SARS冠状病毒非结构蛋白12(sars-nsp12)的外源重组表达及纯化方法在审
| 申请号： | 201110450084.5 | 申请日： | 2011-12-29 |
| 公开（公告）号： | CN103184228A | 公开（公告）日： | 2013-07-03 |
| 发明（设计）人： | 饶子和;杨诚;娄智勇;孙玉娜;王权;李洋;刘素晓;李彩霞;王静;陈卫强 | 申请（专利权）人： | 天津市国际生物医药联合研究院 |
| 主分类号： | C12N15/62 | 分类号： | C12N15/62;C12N15/63;C12N1/21;C12N15/70;C12N9/12;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京德恒律师事务所 11306 | 代理人： | 陆鑫;房岭梅 |
| 地址： | 300457 天津市滨海新区经济技术*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明通过将小泛素样修饰蛋白基因、nsp12基因连入pET-26b载体实现，形成pET26b-S-nsp12-CHis6表达质粒；还通过将类泛素蛋白加工酶连入pET11a载体中实现，形成pET-11a-Ulp表达质粒，然后将上述pET-26b-S-nsp12-CHis6表达质粒和pET11a-Ulp表达质粒同时转入大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中实现nsp12的野生型蛋白的表达、纯化，获得的nsp12的野生型蛋白具有野生型应具有的正常的RNA聚合酶生物学活力，而且其在经过必要的纯化处理，能够用于结晶实验，并可以形成蛋白质晶体。本发明提供了用于可结晶成熟型SARS冠状病毒非结构蛋白12(sars-nsp12)的外源重组表达及纯化方法。 | ||
| 搜索关键词： | 用于 结晶 成熟 sars 冠状病毒 结构 蛋白 12 nsp12 重组 表达 纯化 方法 | ||
【主权项】：
编码一种重组融合蛋白的核酸序列，所述重组融合蛋白由小泛素样修饰蛋白SMT3活性片段、nsp12和多聚His标签组成。
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