[发明专利]富含多糖多酚植物高质量细胞核DNA的提取方法无效
申请号: | 201110456519.7 | 申请日: | 2011-12-30 |
公开(公告)号: | CN102533728A | 公开(公告)日: | 2012-07-04 |
发明(设计)人: | 韩月彭;王鲁;谷超 | 申请(专利权)人: | 中国科学院武汉植物园 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 武汉宇晨专利事务所 42001 | 代理人: | 黄瑞棠 |
地址: | 43007*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明公开了一种富含多糖多酚植物高质量细胞核DNA的提取方法,涉及植物功能基因组学领域。本发明包括下列步骤:①液氮研磨植物材料;②HB抽提缓冲液重悬,涡旋混匀后过滤;③离心,沉淀使用抽提缓冲液1洗三次,重悬;④使用抽提缓冲液2,RnaseH,65摄氏度水浴30分钟;⑤氯仿-异戊醇抽提一次,异丙醇沉淀;⑥冰预冷75%乙醇洗沉淀1-2次,TE缓冲液溶解。本发明预处理步骤能有效去除线粒体、叶绿体等细胞器DNA;避免植物材料中大量存在的多糖、多酚等次生代谢产物对核酸提取步骤产生干扰;适用于广泛植物种的健康组织,或细胞结构较完整的冻存组织,特别适合于后续研究为高通量测序。 | ||
搜索关键词: | 富含 多糖 植物 质量 细胞核 dna 提取 方法 | ||
【主权项】:
一种富含多糖多酚植物高质量细胞核DNA的提取方法,其特征在于:预先提取植物的细胞核,具体步骤如下:①液氮研磨植物材料;②HB抽提缓冲液重悬,涡旋混匀后过滤;③离心,沉淀使用抽提缓冲液1洗三次,重悬;④使用抽提缓冲液2,RnaseH,65摄氏度水浴30分钟;⑤氯仿‑异戊醇抽提一次,异丙醇沉淀;⑥冰预冷75%乙醇洗沉淀1‑2次,TE缓冲液溶解。
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