[发明专利]一种降低头孢菌素C分解的方法有效
| 申请号： | 201110460235.5 | 申请日： | 2011-12-31 |
| 公开（公告）号： | CN102533920A | 公开（公告）日： | 2012-07-04 |
| 发明（设计）人： | 于慧敏;王颖;张婧;罗晖;沈忠耀 | 申请（专利权）人： | 清华大学 |
| 主分类号： | C12P35/02 | 分类号： | C12P35/02;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京众合诚成知识产权代理有限公司 11246 | 代理人： | 史双元 |
| 地址： | 100084 北京市*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明属于生物工程技术领域的一种降低头孢菌素C分解的方法。采用Red重组系统，将宿主菌的β-内酰胺酶和乙酰基酯酶基因敲除，然后将头孢菌素C酰化酶基因转化入上述宿主菌，宿主菌表达头孢菌素C酰化酶，然后制备头孢菌素C酰化酶粗酶液或固定化头孢菌素C酰化酶粗酶，加入到头孢菌素C底物工作液中催化其生成7-氨基头孢烷酸。采用本发明的方法制备的CPC酰化酶，收获的粗酶在催化CPC生成7-ACA过程中，使CPC利用率提高至98％以上。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 降低 头孢菌素 分解 方法 | ||
【主权项】：
一种降低头孢菌素C分解的方法，其特征在于，首先，采用Red重组系统，将宿主菌的β‑内酰胺酶和乙酰基酯酶基因敲除，然后将头孢菌素C酰化酶基因转化入上述宿主菌，宿主菌表达头孢菌素C酰化酶，然后采用细胞破碎、离心分离的方法制备头孢菌素C酰化酶粗酶液，或者采用细胞破碎、离心分离和固定化方法制备固定化头孢菌素C酰化酶粗酶，将制备的头孢菌素C酰化酶粗酶液或固定化头孢菌素C酰化酶粗酶加入到头孢菌素C底物工作液中催化其生成7‑氨基头孢烷酸。
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