[发明专利]优质多花黄精试管苗快速繁殖方法

摘要

优质多花黄精试管苗快速繁殖方法，涉及植物组培技术，培养基配方为：诱导培养基MS+1.0mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA；带芽块根的增殖培养基MS+10mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA+糖60g/L；芽体部分增殖培养基MS+1.0mg/L 6-BA+0.5mg/L 2，4-D+糖60g/L；块根部分增殖壮苗培养基MS+1.0mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA+多效唑0-50mg/L+糖60g/L；块根部分生根培养基MS+0.5mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA+0.5％活性炭；步骤为：将已消毒处理过的带芽的块根剖去块根部分表层，诱导培养、增殖培养基培养后切成块根和芽体，块根转接增殖培养、循环增殖培养3-6代，芽体转接芽体部分增殖培养、进行3-6代复合循环增殖、末代终产物带芽的块根增殖壮苗培养、生根培养。快速繁殖规模化生产。

主权项

优质多花黄精试管苗快速繁殖方法，包括培养基的配制；繁殖方法的步骤为：外植体的选取、预处理和消毒→诱导培养基培养→增殖培养基培养→增殖壮苗培养基培养→生根培养基培养；各组培阶段的培养条件是：温度25±2℃、光照时间12h/d，诱导阶段采用散射光，增殖、壮苗和生根阶段光照强度2000Ix；其特征在于：(一)培养基的配制：各种培养基配方为：(I)诱导培养基MS+1.0mg/L 6‑BA+0.5mg/L NAA；(II)带芽块根的增殖培养基MS+1.0mg/L 6‑BA+0.5mg/L NAA+糖60g/L；(III)芽体部分增殖培养基MS+1.0mg/L 6‑BA+0.5mg/L 2，4‑D+糖60g/L；(IV)块根部分增殖壮苗培养基MS+1.0mg/L 6‑BA+0.5mg/L NAA+多效唑0‑50mg/L+糖60g/L；(V)块根部分生根培养基MS+0.5mg/L 6‑BA+0.5mg/L NAA+0.5％活性炭；以上I‑V号培养基pH均介于5.6‑5.7之间；(二)繁殖方法的步骤为：①外植体的选取、预处理和消毒：材料选取当年的9、10月份，于晴天选取多花黄精带芽的块根，将其清洗干净后，置于1/700浓度的甲基托布津中浸泡30min取出，置于常温条件晾干，之后用常规的消毒技术对带芽的块根进行消毒，最后用无菌滤纸将无菌水吸干备用；②诱导培养基培养：将已消毒处理过的带芽的块根用解剖刀剖去块根部分表层，只留主芽加0.8‑1.2cm3的块根，接入(I)号诱导培养基上进行诱导培养，40‑50天后，诱导出新的幼芽，块根部分膨大；③增殖培养基培养：(a)、将已诱导出新芽的块根转接(II)号带芽块根的增殖培养基进行增殖培养，30‑40天后，块根部分膨大，新的芽体冒出；(b)、将已增殖的带芽的块根切成块根部分和芽体部分，块根部分转接(II)号带芽块根的增殖培养基上，30‑40天后，再次膨大，新的芽体再次冒出；生长出的新的增殖带芽的块根，新的增殖带芽的块根重复循环本(b)分步骤上述过程增殖培养3‑6代产生末代终产物带芽体的块根及中间产物分切下来的芽体，末代终产物带芽体的块根即可进入已增殖块根部分后续的增殖壮苗培养基培养步骤；(c)、将(b)分步骤中循环步骤切分下来的中间产物芽体部分转接(III)号芽体部分增殖培养基上，30‑40天后，芽体部分基部块根膨大，而后再返回(b)分步骤与(c)分步骤上述过程进行3‑6代复合循环增殖，最后产生末代终产物带芽体的块根；④增殖壮苗培养基培养：将经过(b)分步骤循环及经过(b)(c)分步骤复合循环增殖培养产生的末代终产物带芽体块根的块根部分转接(IV)号块根部分增殖壮苗培养基进行壮苗培养，30‑40天后，块根再次膨大，新的芽体冒出；⑤生根培养基培养：将经步骤④壮苗的块根部分接种到(V)号块根部分生根培养基上，20‑30天后，块根部分基部长出根系即可进行组培苗的驯化和移栽。