[发明专利]经修饰的蛋白及其制备和使用方法有效
申请号: | 201180018980.2 | 申请日: | 2011-02-28 |
公开(公告)号: | CN103097547B | 公开(公告)日: | 2018-06-05 |
发明(设计)人: | J·F·戴维森;W·欣茨;J·罗思伯格;R·惠特克 | 申请(专利权)人: | 生命技术公司 |
主分类号: | C12Q1/6869 | 分类号: | C12Q1/6869;C12N9/12 |
代理公司: | 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 11038 | 代理人: | 李程达 |
地址: | 美国明*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | 提供了包含经修饰的蛋白、特别是具有改变的缓冲特性的经修饰的核酸‑结合蛋白的方法,组合物,系统,装置和试剂盒。例如,在一些实施方案中,描述了形成经修饰的蛋白的方法,所述经修饰的蛋白包括一个或多个氨基酸修饰以实现所需的pKa值。此外,本发明提供了在产生离子的反应,例如基于离子的核酸测序反应中,使用所述经修饰的蛋白的方法。 | ||
搜索关键词: | 修饰 蛋白 离子 核酸测序反应 氨基酸修饰 缓冲特性 结合蛋白 试剂盒 核酸 制备 | ||
【主权项】:
检测核苷酸掺入的方法,包括:(a)使用经修饰的Bst聚合酶进行核苷酸掺入并产生一个或多个氢离子作为所述核苷酸掺入的副产物,其中所述经修饰的Bst聚合酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示,其中所述修饰的Bst聚合酶相对于SEQ ID NO:1所示的未经修饰的聚合酶具有降低的缓冲能力;和(b)检测作为所述核苷酸掺入的副产物产生的所述一个或多个氢离子的存在,从而检测所述核苷酸掺入。
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