[发明专利]马克斯克鲁维酵母转化体的制造方法在审
申请号: | 201180021394.3 | 申请日: | 2011-02-01 |
公开(公告)号: | CN102892884A | 公开(公告)日: | 2013-01-23 |
发明(设计)人: | 赤田伦治;星田尚司;B·M·A·阿布德尔-巴纳特;浅川润 | 申请(专利权)人: | 国立大学法人山口大学 |
主分类号: | C12N15/09 | 分类号: | C12N15/09;C12N1/19;C12P1/00;C12R1/645 |
代理公司: | 北京市金杜律师事务所 11256 | 代理人: | 杨宏军 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 日本;JP |
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摘要: | 本发明的课题在于提供一种不使用特定的限制酶及其识别序列,而利用简单且有效地将DNA片段的末端联结起来的方法制造马克斯克鲁维酵母转化体的方法,以及使用该转化体的有用物质的制造方法等。由此,发现了下述解决手段:将不含马克斯克鲁维酵母菌的自主复制序列的二种以上的直链状的双链DNA片段导入马克斯克鲁维酵母菌,以通过所希望的DNA连接体表达的标记基因的表达为指标,选择包含所希望的DNA连接体的转化体,或者,将含有马克斯克鲁维酵母菌的自主复制序列的直链状的双链DNA片段单独导入或与一种以上的其它直链状的双链DNA片段组合导入马克斯克鲁维酵母菌,以通过所希望的DNA连接体表达的标记基因的表达为指标,选择包含所希望的DNA连接体的转化体。 | ||
搜索关键词: | 马克 克鲁 酵母 转化 制造 方法 | ||
【主权项】:
一种转化酵母的制造方法,所述转化酵母包含含有二种以上直链状的双链DNA片段的DNA连接体,所述方法特征在于依次具有如下步骤(a)和(b):(a)将不包含自主复制序列的二种以上的直链状的双链DNA片段导入马克斯克鲁维酵母菌的步骤,其中,所述二种以上的直链状的双链DNA片段是下述二种以上的直链状的双链DNA片段:各双链DNA片段单独时不包含标记基因的表达所必需的全部序列,只在多个双链DNA片段连接并形成了所希望的DNA连接体的情况下,才包含使标记基因的表达成为可能的序列;(b)以标记基因的表达为指标来选择通过所述步骤(a)得到的、所述所希望的DNA连接体被插入到基因组DNA中的转化体的步骤。
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