[发明专利]在细胞培养物中生产重组ADAMTS13的方法有效
申请号: | 201180043094.5 | 申请日: | 2011-07-08 |
公开(公告)号: | CN103097522A | 公开(公告)日: | 2013-05-08 |
发明(设计)人: | L·格里尔贝格尔;M·赖特尔;D·弗莱尚德尔;G·布兰贝格尔 | 申请(专利权)人: | 巴克斯特国际公司;巴克斯特保健股份有限公司 |
主分类号: | C12N5/10 | 分类号: | C12N5/10;C12N9/48;C07K14/745;A61K38/36 |
代理公司: | 上海市华诚律师事务所 31210 | 代理人: | 傅强国;贾师英 |
地址: | 美国伊*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | 除了其它方面以外,本发明涉及用于生产高分子量vWF(具体地,具有高比活性的高度多聚的WF和具有高比活性的ADAMTS13)的细胞培养条件。本发明的细胞培养条件可以包括,例如,具有增加的铜浓度的细胞培养基和/或具有低铵(NH4+)浓度的细胞培养物上清液。本发明也提供了在细胞培养条件中培养细胞以表达具有高比活性的高分子量vWF和rA13的方法。 | ||
搜索关键词: | 细胞培养 生产 重组 adamts13 方法 | ||
【主权项】:
一种用于生产重组ADAMTS13(rA13)组合物的方法,所述方法包括下述步骤:(a)提供基础细胞培养基;(b)给所述基础细胞培养基补充铜,以提供至少1.0μg/L的最终铜浓度;(c)提供一个或多个细胞,所述一个或多个细胞包含编码rA13蛋白的核酸;(d)在补充了铜的细胞培养基中培养所述一个或多个细胞,使得所述细胞表达rA13并将其分泌进培养物上清液中;和(e)回收所述培养物上清液的至少一部分,其中在所述回收的培养物上清液中存在每天每升经补充的基础细胞培养基至少1500单位FRETS‑VWF73活性。
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