[发明专利]用于PCR反应缓冲液中的细胞裂解的方法有效
申请号: | 201180048151.9 | 申请日: | 2011-09-30 |
公开(公告)号: | CN103124796A | 公开(公告)日: | 2013-05-29 |
发明(设计)人: | I.霍夫曼 | 申请(专利权)人: | 霍夫曼-拉罗奇有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人: | 权陆军 |
地址: | 瑞士*** | 国省代码: | 瑞士;CH |
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摘要: | 本发明一般而言提供了用于扩增靶DNA的方法,其包括步骤(i)将包含至少一个或多个活细胞的具有第一体积的液体转移到容器内,(ii)向所述容器中加入具有第二体积的PCR反应缓冲液,其中所述第二个体积是所述第一体积至少2x大,(iii)通过在至少90℃温育至少1分钟,裂解所述容器内的所述至少一个或多个活细胞,以及(iv)通过聚合酶链反应而不执行中间纯化步骤来扩增所述靶。 | ||
搜索关键词: | 用于 pcr 反应 缓冲液 中的 细胞 裂解 方法 | ||
【主权项】:
用于扩增靶核酸的方法,其包括步骤a)将包含一个或多个活细胞的具有第一体积的液体样品转移到容器内,b)向所述容器中加入具有第二体积的PCR反应缓冲液,其中所述第二体积是所述第一体积至少2x大,c)将所述容器在至少90℃温育至少30秒,d)通过用热稳定的DNA依赖性DNA聚合酶的聚合酶链反应来扩增所述靶,而不执行中间纯化步骤,其特征在于在步骤b)过程中加入的PCR反应缓冲液包含至少一对扩增引物、热稳定的DNA聚合酶和dNTPs。
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