[发明专利]用于检测针对靶抗体的中和抗体的双功能体外靶结合测定

摘要

公开了一种体外测定方法。这种非基于细胞的双功能靶结合测定用于检测生物样本(例如，血清样本)中的IgG靶抗体，如生物药物，以及针对所述IgG靶抗体的中和抗体(NAb)的存在。

主权项

一种体外测定方法，包括：在允许生理条件下进行检测的一定体积的新配制缓冲液存在下通过测量信号来检测抗生物素蛋白涂敷孔中特异性结合多组氨酸的任何抗体，所述抗体已结合多组氨酸标记的重组人CD16a多肽，其中所述抗生物素蛋白涂敷孔已被预先封闭，并且随后已在生理条件下将预培育的反应混合物在所述封闭的抗生物素蛋白涂敷孔中培育，其中在其预培育过程中，将所述预培育反应混合物悬浮在含有血清的水性测定缓冲液中，并且所述预培育反应混合物包含：(i)包含具有CD16a结合位点的Fc结构域的靶抗原结合蛋白；和(ii)目标靶蛋白的生物素化多肽部分，所述靶抗原结合蛋白与所述多肽部分特异性结合；并且其中，在所述抗生物素蛋白涂敷孔中培育所述预培育反应混合物之后，在生理条件下将悬浮在一定体积的新配制测定缓冲液中的多组氨酸标记的重组人CD16a多肽与任何靶抗原结合蛋白一起培育，所述靶抗原结合蛋白已与生物素化多肽部分结合，所述生物素化多肽部分已与所述抗生物素蛋白涂敷孔的抗生物素蛋白结合；并且其中，在通过测量信号进行检测之前，在生理条件下，将悬浮在一定体积的新配制测定缓冲液中的特异性结合多组氨酸的所述抗体与任何多组氨酸标记的重组人CD16a多肽一起在所述孔中培育，所述多组氨酸标记的重组人CD16a多肽已与所述靶抗原结合蛋白结合。