[发明专利]一种具有抗HIV-1病毒的结核基因疫苗及其制备方法和应用

摘要

一种具有抗HIV-1病毒的结核基因疫苗，由一个载体构成，在载体中插入有外源目的基因，外源目的基因包括一个HIV-1NL4-3株来源的衣壳蛋白p24的基因，在衣壳蛋白p24的基因中嵌合有来自结核杆菌抗原的T细胞表位多肽基因MPT6476-84、Ag85A242-250、Ag85B184-192和TB10.474-82。本发明还公开了这种抗HIV-1病毒的结核基因疫苗的制备方法和应用。通过将基因疫苗肌肉注射免疫小鼠，可诱导针对结核抗原的分泌高水平IFNγ的Th1型免疫应答和特异性杀伤应答，同时还可诱导针对HIV-1抗原p24特异性血清IgG及T细胞免疫应答，是一种可预防结核病和抗HIV的疫苗。

主权项

一种具有抗HIV‑1病毒的结核基因疫苗，由一个载体构成，在所述的载体中插入有一段外源目的基因，其特征在于：所述的外源目的基因包括一个人类免疫缺陷病毒HIV‑1NL4‑3株来源的衣壳蛋白p24的全长基因，在所述的人类免疫缺陷病毒HIV‑1NL4‑3株来源的衣壳蛋白p24的全长基因中嵌合有来自结核杆菌抗原的4个T细胞表位多肽基因，所述的4个T细胞表位分别是结核分枝杆菌H37Rv株来源的MPT64蛋白的76～84位基因，结核分枝杆菌H37Rv株来源的Ag85A蛋白的242～250位基因，结核分枝杆菌H37Rv株来源的Ag85B蛋白的184～192位基因，结核分枝杆菌H37Rv株来源的TB10.4蛋白的74～82位基因，从人类免疫缺陷病毒HIV‑1NL4‑3株来源的衣壳蛋白p24全长基因的5’开始，在第1位碱基前插入结核分枝杆菌H37Rv株来源的MPT64蛋白的76～84位基因，在第273位碱基后插入结核分枝杆菌H37Rv株来源的Ag85A蛋白的242～250位基因，在第303位碱基后插入结核分枝杆菌H37Rv株来源的Ag85B蛋白的184～192位基因，在第441位碱基后插入结核分枝杆菌H37Rv株来源的TB10.4蛋白的74～82位基因，所述的人类免疫缺陷病毒HIV‑1NL4‑3株来源的衣壳蛋白p24全长基因的DNA序列如SEQ IDNO：2所示，所述的结核分枝杆菌H37Rv株来源的MPT64蛋白的76～84位基因的DNA序列如SEQ ID NO：4所示，所述的结核分枝杆菌H37Rv株来源的Ag85A蛋白的242～250位基因的DNA序列如SEQ ID NO：6所示，所述的结核分枝杆菌H37Rv株来源的Ag85B蛋白的184～192位基因的DNA序列如SEQ ID NO：8所示，所述的结核分枝杆菌H37Rv株来源的TB10.4蛋白的74～82位基因的DNA序列如SEQ ID NO：10所示。