[发明专利]基于多重放大系统的检测玉米赤霉烯酮的方法有效
| 申请号： | 201210002342.8 | 申请日： | 2012-01-06 |
| 公开（公告）号： | CN102608324A | 公开（公告）日： | 2012-07-25 |
| 发明（设计）人： | 严亚贤;王元凯;孙建和 | 申请（专利权）人： | 上海交通大学 |
| 主分类号： | G01N33/64 | 分类号： | G01N33/64 |
| 代理公司： | 上海汉声知识产权代理有限公司 31236 | 代理人： | 郭国中 |
| 地址： | 200240 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种基于多重放大系统的检测玉米赤霉烯酮的方法，包括以下步骤：将ZEN半抗原与OVA偶联，得到偶联物ZEN-OVA，再与biotin偶联，得到偶联物OVA-ZEN-biotin；将抗ZEN单克隆抗体与免疫磁珠结合；将抗体-磁珠结合物加入EP管中，洗涤，将待侧样品的萃取液加入上述EP管中，震荡，去除上清液，洗涤，再加入OVA-ZEN-biotin，震荡，去除上清液，洗涤，再加入SA-HRP，震荡，去除上清液，洗涤，最后加入发光底物，震荡，测定发光值；制作标准曲线，再根据待测样品的发光值，通过标准曲线得到对应的ZEN浓度。本发明采用抗ZEN单克隆抗体，与其他谷物中的真菌毒素无交叉反应，特异性强，减少了假阳性率。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 多重 放大 系统 检测 玉米 赤霉烯酮 方法 | ||
【主权项】：
一种基于多重放大系统的检测玉米赤霉烯酮的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一，将ZEN半抗原与OVA偶联，得到偶联物ZEN‑OVA，再与biotin偶联，得到偶联物OVA‑ZEN‑biotin；步骤二，将抗ZEN单克隆抗体与免疫磁珠结合，得到抗体‑磁珠结合物；步骤三，将所述抗体‑磁珠结合物加入EP管中，用洗涤液洗涤，对待侧样品进行萃取，将待侧样品的萃取液稀释后加入上述管中，震荡；步骤四，去除上清液，用洗涤液洗涤，再加入所述OVA‑ZEN‑biotin，震荡；步骤五，去除上清液，用洗涤液洗涤，再加入SA‑HRP，震荡；步骤六，去除上清液，用洗涤液洗涤，加入发光底物，震荡，测定发光值；步骤七，根据已知不同浓度ZEN与抗玉米赤霉烯酮单克隆抗体加入后得到的发光值，制作标准曲线，再根据待测样品的发光值，通过标准曲线得到样品中的ZEN浓度。
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