[发明专利]在制备抗毒素、抗血清中灭活病毒的方法

摘要

本发明提供一种在制备抗毒素、抗血清中灭活病毒的方法，它将原料马血浆稀释并经胃酶消化、加温变性去沉淀后，加入有机溶剂和去污剂进行病毒灭活，再经硫酸铵盐析分离、明矾吸附、超滤浓缩/脱盐、离子交换层析得收集液，经除菌过滤后，分装得制品。通过有机溶剂和去污剂破坏病毒的脂质包膜，使其失去传染性，从而彻底灭活血浆中残留的病毒，同时保持蛋白的结构和功能，之后再有效除去有机溶剂和去污剂的残留，使制品纯度进一步提高，不仅病毒灭活操作简单，处理时间短，经济实用，而且所得制品纯度高、安全性好。

主权项

一种在制备抗毒素、抗血清中灭活病毒的方法，其特征在于包括下列步骤：A、将血浆原料稀释２～４倍体积后，调节稀释液pH值至2.8～4.0；B、在每100ml步骤A的稀释液中，加入0.1～1.0g胃酶，于29～31℃下消化１～3小时，或者于20～22℃下消化20～22小时，得消化液；C、在每100ml步骤B的消化液中，加入14～16ｇ硫酸铵，并调节混合液pH值至4.8～5.6，加热混合液至57～59℃，并保持30分钟，降温至45℃以下，分离，得上清液；D、将步骤C的上清液稀释至所含蛋白浓度为10～50 g/L，在该稀释液中加入有机溶剂和去污剂，直至每100ml稀释液中含有0.25～1.35g的有机溶剂，每100ml稀释液中含有1.00～1.35g的去污剂，于24～37℃水浴中恒温4～6小时，得混合液；E、在每100ml步骤D的混合液中，加入15～25 g硫酸铵，静置90～180分钟，分离去上清液，得沉淀物；F、将步骤E的沉淀物稀释至蛋白含量低于20 g/L，调整稀释液pH值为7.7～7.9，并按每100ml稀释液加入0.6～1.0g明矾的量，在稀释液中加入明矾，静置60～120分钟后，过滤得上清液；G、将步骤F的上清液用3～5万分子量的滤膜，浓缩至五分之一体积时，在浓缩液中加入20mM、pH值为6.0～8.0、加入量是步骤A的原料血浆体积的2～5倍的PB进行置换、浓缩，直至硫酸铵含量低于1.0 g/L，得浓缩液；H、将步骤F的浓缩液，经离子交换层析后，得收集液，按常规对收集液进行除菌、过滤后，分装得灭活病毒的抗毒素、抗血清制品。