[发明专利]一种从雪峰干酵母中分离乙醛脱氢酶的方法无效
| 申请号： | 201210005420.X | 申请日： | 2012-01-10 |
| 公开（公告）号： | CN102533684A | 公开（公告）日： | 2012-07-04 |
| 发明（设计）人： | 吴晖;赖富饶;陈贵川 | 申请（专利权）人： | 华南理工大学 |
| 主分类号： | C12N9/02 | 分类号： | C12N9/02 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 510640 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种从雪峰干酵母中分离乙醛脱氢酶的制备方法，包括如下步骤：将雪峰干酵母加入水中，孵育，得湿酵母并加入磷酸盐缓冲液中配制成菌悬液，将该菌悬液超声波破碎后，离心，收集上清液，即为粗酶液；将饱和度为30%~60%的硫酸铵加入上述所得的粗酶液中，离心，取其上清液，再将饱和度为65%~85%的硫酸铵加入该上清液中，离心，取其沉淀，并向该沉淀中加入磷酸盐缓冲液，待沉淀完全溶解后，分离，即可得到所需的乙醛脱氢酶酶。本发明突破了乙醛脱氢酶来源的局限性，实现了原料的来源广、价格低廉和易培养，具有产品活性高、产品纯度高和反应过程简单可控的优点。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 雪峰 干酵母 分离 乙醛 脱氢酶 方法 | ||
【主权项】：
一种从雪峰干酵母中分离乙醛脱氢酶的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）将雪峰干酵母加入水中混匀，在30℃~40℃的水浴中孵育10min~20min，再高速离心后取沉淀即得湿酵母；其中雪峰干酵母的重量与水的体积比为：5%~15%；（2）将该湿酵母加入浓度为0.05mol/L、pH为7.5~8.5的磷酸盐缓冲液中配制成菌悬液，将该菌悬液超声波破碎后，离心，收集上清液，即为粗酶液；其超声波破碎的条件为：处理量为15mL~25mL、温度1℃~8℃、超声功率为250W~350W、每次超声时间1~4s、间隔时间1~8s、总的超声时间10~20min；湿酵母的重量与磷酸盐缓冲液的体积比为15%~25%；（3）将饱和度为30%~60%的硫酸铵加入上述所得的粗酶液中，离心，取其上清液，再将饱和度为65%~85%的硫酸铵加入该上清液中，离心，取其沉淀，并向该沉淀中加入磷酸盐缓冲液，待沉淀完全溶解后，分离，即可得到所需的乙醛脱氢酶酶。
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