[发明专利]一种用于基因治疗的细胞的构建方法及制得的细胞无效
| 申请号： | 201210013934.X | 申请日： | 2012-01-17 |
| 公开（公告）号： | CN102586324A | 公开（公告）日： | 2012-07-18 |
| 发明（设计）人： | 吴东海 | 申请（专利权）人： | 中国科学院广州生物医药与健康研究院 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N5/10;A61K48/00;A61P7/06 |
| 代理公司： | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人： | 谭英强 |
| 地址： | 510530 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了可用于基因治疗的细胞的构建方法，通过构建带有正常基因的修复载体、同源敲除载体，使用敲除载体敲除患者iPSC的致病基因，之后使用修复载体对iPSC进行重组修复，得到用于基因治疗的iPSC细胞。该方法可以快速，大量的修复细胞中的多类型和多个基因突变。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 用于 基因治疗 细胞 构建 方法 | ||
【主权项】：
一种用于基因治疗的细胞的构建方法，包括如下步骤：1）将载体中引入重组酶识别序列，在识别序列间插入正常基因序列，得到修复载体；2）将正常基因序列与线性化酶切位点引入载体中，得到同源敲除载体；3）将敲除载体线性化，加入同源正常基因序列特异性的锌指核酸酶，共转染致病基因的iPSC，敲除iPSC中的突变基因，筛选出至少一条同源突变基因被敲除的阳性iPSC细胞；4）将修复载体、表达重组酶的载体共转入筛选得到的iPSC细胞，基于重组酶识别序列和重组酶，进行基因的置换修复，得到可用于基因治疗的阳性iPSC细胞。
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