[发明专利]一种组织工程骨/软骨一体支架的制备方法

摘要

本发明公开了一种组织工程骨/软骨一体支架的制备方法，仿生天然关节软骨的组成成分和空间结构特征，选用软骨细胞外基质和骨基质明胶为主要原料，采用不同浓度叠加、定向结晶、冷冻干燥、交联反应等方法获得内部孔隙取向排列、孔径沿厚度方向梯度变化、力学性能良好的一体化支架结构。该支架良好的生物相容性利于细胞粘附和增殖，其特殊的孔隙结构使细胞分泌的基质含量也呈梯度变化，同时骨基质明胶基底为支架与受损部位的即时固定提供了良好的力学支撑。

主权项

一种组织工程骨/软骨一体支架的制备方法，包括以下步骤：1)取新鲜关节软骨制备成浓度为1～2％和3～4％的两种不同浓度的软骨细胞外基质浆料；2)将松质骨切片并进行去脂、脱钙、脱细胞处理，得到骨基质明胶片；3)选用一深度可调节的模具，模具的顶端敞口，底部可活塞式移动；4)将裁剪为模具横截面形状的骨基质明胶片放置在模具底部，然后倒入浓度为3～4％的软骨细胞外基质浆料，使浆料浸透骨基质明胶片的空隙并淹没过骨基质明胶片；5)再往模具中加入浓度为1～2％的软骨细胞外基质浆料，垂直振动使上下两层浆料之间自然融合；6)调节模具深度，使浆料上表面与敞口端齐平，用金属片盖住敞口端并与浆料完全接触，用保温材料包裹模具四周及底面，然后将模具冷冻，进行定向结晶；7)去除金属片及保温材料，将模具移入冷冻干燥机进行冷冻干燥，得到成型支架；8)在支架具有骨基质明胶片的一端涂抹透明质酸溶液与纳米羟基磷灰石的混悬液，通过毛细作用使混悬液进入支架孔隙中；9)将支架进行紫外辐照和化学交联，清洗后冷冻干燥，得到组织工程骨/软骨一体支架。