[发明专利]一种蚯蚓提取物及其提取方法和应用

摘要

本发明涉及一种蚯蚓提取物及其提取方法和应用，其中，提取物由以下方法提取获得：(1)粗多肽的制备：将冰冻蚯蚓1kg，切成小段，用预先冷却的蒸馏水冲洗，至完全无血色为止；绞成肉泥，加入预冷的匀浆液，用胶体磨反复匀浆；所得匀浆液离心，取上清，加入95％乙醇使其终浓度达到60％，4℃放置并搅拌，4h后离心，取上清；所得上清真空旋转蒸发回收乙醇至浓缩液体积为500ml；浓缩液冷冻干燥，得到蚯蚓多肽粗提物，-20℃保存为冻干品待用；(2)粗多肽进行脱盐纯化，得到的冻干品即为蚯蚓多肽。本发明建立系统的蚯蚓多肽提取方法，通过该方法可以获得纯度及收率较高的活性蚯蚓多肽；证明蚯蚓多肽对1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氢吡啶离子(MPP+)所致大鼠嗜铬神经瘤细胞(PC12)损伤具有保护作用。

主权项

一种蚯蚓提取物，其特征在于：由以下方法提取获得：(1)粗多肽的制备：、将冰冻蚯蚓1kg，切成小段，用预先冷却的蒸馏水冲洗，至完全无血色为止；绞成肉泥，加入预冷的匀浆液，用胶体磨反复匀浆；所得匀浆液离心，取上清，加入95％乙醇使其终浓度达到60％，4℃放置并搅拌，4h后离心，取上清；所得上清真空旋转蒸发回收乙醇至浓缩液体积为500ml；浓缩液冷冻干燥，得到蚯蚓多肽粗提物，‑20℃保存为冻干品待用；(2)粗多肽的脱盐纯化：取步骤(1)所得的冻干品2.5g，用10ml蒸馏水溶解，以Sephadex G‑25为介质装填层析柱、，层析柱用蒸馏水充分平衡，将样品加入柱内，用蒸馏水洗脱，流速为2.5ml/min，至出峰时起用自动馏分收集器收集，每管10ml；测定各管的电导率，将峰前部分收集，冻干得冻干品即为蚯蚓多肽。