[发明专利]一种小麦胚芽活性多肽的制备方法

摘要

本发明涉及一种从脱脂小麦胚芽粉中提取活性多肽的方法及应用，该方法通过复合蛋白酶对脱脂小麦胚芽粉进行水解，得粗制多肽液，然后进行脱色，滤纸过滤，微滤膜过滤，纳滤膜过滤，得多肽浓缩液，再通过大孔树脂柱处理得产品。本发明制得的活性多肽，将其作为一种活性成分添加到产品中，提高小麦胚芽的附加值。

主权项

一种小麦胚芽活性多肽的制备方法，包括如下步骤：（1）将脱脂麦胚粉加水混匀，使料液比为1：8‑10，110℃灭菌10~30min，等温度降到50~55℃，调pH至8.0，分别按每克脱脂麦胚粉添加1000U Alcalase蛋白酶、300U风味蛋白酶，维持50~55℃反应1.2‑1.5h，快速升温至95℃，保持10～15min，水解液冷却到常温后，10000rpm离心15min，取上清液，得粗制多肽液；（2）在粗制多肽液用水稀释3倍，按脱脂麦胚粉重量的1‑1.2%加入活性炭，在50~55℃下搅拌反应30min，15000rpm离心15min，取上清液，得粗制脱色多肽液；（3）将粗制脱色多肽液先后经滤纸过滤，100nm微滤膜过滤，500Da纳滤膜过滤，得多肽浓缩液；（4）将大孔树脂DA201‑C用无水乙醇浸泡16h，用乙醇洗至洗出液加适量水无白色浑浊，再用去离子水洗至无乙醇味，接着用4倍体积的6%( v/v)盐酸溶液浸泡2h，再用去离子水洗至中性，再用4倍体积的6%(w/w)氢氧化钠溶液浸泡2h，再用去离子水洗至中性，得到处理好的湿树脂；（5）将处理好的湿树脂装入层析柱，以步骤（3）所得的多肽浓缩液进行上样，上样速度为1.0ml/min，每15min取样，测定电导率以及220nm处的吸光度值A220，当A220达到0.05时，停止上样，换用去离子水洗，上液速度为2ml/min，直至电导率不再变化，换用70%(v/v)乙醇进行动态洗脱，洗脱流速为2ml/min，当A220接近0.05时开始收集样品，最终当A220不再变化，则停止收集，所得样品经浓缩蒸去乙醇，冷冻干燥。