[发明专利]抗口蹄疫病毒复制与感染的重组腺病毒及制备与应用

摘要

本发明公开一种抗口蹄疫病毒复制与感染的重组腺病毒及其制备与应用。本发明通过将siRNA-3D的转录模板、siRNA-L的转录模板、siRNA-2B的转录模板与siRNA-VP1的转录模板分别与U6启动子连接，克隆入载体pAdeno-X，得到能分别转录、串联结构的质粒，再将该质粒线性化后通过包装细胞包装，得到重组腺病毒rAdeno-3D-L-2B-VP1。该重组腺病毒rAdeno-3D-L-2B-VP1的防治效果优于重组腺病毒rAdeno-2B-VP1应用的效果。可见，本发明提供的重组质粒能有效抑制口蹄疫病毒复制和抗口蹄疫病感染。

主权项

1.一种抗口蹄疫病毒复制与感染的重组腺病毒，其特征在于：为腺病毒重组质粒pAdeno-3D-L-2B-VP1线性化后，经过包装细胞包装得到；所述的腺病毒重组质粒pAdeno-3D-L-2B-VP1的载体为pAdeno-X，重组基因片段为四个串联的、能分别独立转录的基因片段；所述的四个串联的、能分别独立转录的片段为U6启动子与siRNA-3D的转录模板融合基因片段、U6启动子与siRNA-L的转录模板融合基因片段、U6启动子与siRNA-2B的转录模板融合基因片段和U6启动子与siRNA-VP1的转录模板融合基因片段；siRNA-3D的转录模板的核苷酸序列如下所示：正义链为：5’-ATCCTGCCACGGAGATCAAC-3’反义链为：5’-GTTGATCTCCGTGGCAGGAT tctcttgaa-3’siRNA-L的转录模板的核苷酸序列如下所示：正义链为：5’-ttcaagagaGCGGTGCCGATTCCGGTGT-3’反义链为：5’-ACACCGGAATCGGCACCGCtctcttgaa-3’siRNA-2B的转录模板的核苷酸序列如下所示：正义链为：5’-ttcaagagaC-3’；反义链为：5’-GCCAGATGCAGGAAGACATGCATGTCTTCCTGCATCTGG-3’；siRNA-VP1的转录模板的核苷酸序列如下所示：正义链为：5’-ttcaagagaAGTCACGGGGTCCGCAGACTCC-3’；反义链为：5’-GGAGTCTGCGGACCCCGTGACTAGTCACGGGGTCCGCAGACTC-3’；以上序列的小写部分为茎环结构，粗体部分和斜体部分互补。