[发明专利]梅花鹿IGF-1多肽及其制备方法无效
申请号: | 201210018003.9 | 申请日: | 2012-01-20 |
公开(公告)号: | CN102586257A | 公开(公告)日: | 2012-07-18 |
发明(设计)人: | 胡薇;孟星宇;李婷;李沐;胡锐;王健;李雨婷;田玉华;刘宁 | 申请(专利权)人: | 吉林农业大学 |
主分类号: | C12N15/12 | 分类号: | C12N15/12;C07K14/475;C12N15/70 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 130118 吉林省*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | 本发明公开了一种梅花鹿IGF-1成熟肽的基因,并在上游引物5端添加EcoR I酶切位点和编码Asn的碱基序列,下游引物5端添加Hind III酶切位点和终止密码子序列,克隆了表达梅花鹿IGF-1成熟肽的碱基序列234bp基因,构建了表达载体pET-32a-IGF-1,在大肠杆菌Rosetta中诱导表达,获得了梅花鹿IGF-1成熟肽。引入EcoR I、Hind III酶切位点,在天然的IGF-1前面添加一个Asn,形成一个羟胺的特异裂解部位,降低了蛋白切割成本,减少额外氨基酸序列对蛋白复性的影响,保持蛋白在天然条件下的状态;采用pET-32a作表达载体在大肠杆菌Rosetta中表达,蛋白含量可达菌体可溶蛋白的50%以上,通过MTT法检测,能提高NIH3T3细胞增殖速度。 | ||
搜索关键词: | 梅花鹿 igf 多肽 及其 制备 方法 | ||
【主权项】:
梅花鹿IGF‑1成熟肽的基因,其核苷酸序列如序列表SEQ ID NO.1所示。
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