[发明专利]利用实时荧光PCR技术检测胆囊结石中华支睾吸虫DNA的方法无效
| 申请号： | 201210021338.6 | 申请日： | 2012-01-31 |
| 公开（公告）号： | CN103224976A | 公开（公告）日： | 2013-07-31 |
| 发明（设计）人： | 乔铁;郑培明;谢景夏;马瑞红;罗小兵;罗振亮 | 申请（专利权）人： | 广州市番禺区胆囊病研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 广州新诺专利商标事务所有限公司 44100 | 代理人： | 罗毅萍;刘婉 |
| 地址： | 511470 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种利用实时荧光PCR技术检测胆囊结石中华支睾吸虫DNA的方法，其包括以下步骤：1)胆囊结石预处理；2)提取胆囊结石中的DNA；3)设计并合成特异性引物及探针；4)实时荧光PCR反应。本发明提供的方法能够高效提取胆囊结石中华支睾吸虫的DNA，并且无需电泳，可以节省检测时间，灵敏度高，并有效避免有毒物质的污染，为研究华支睾吸虫卵与胆囊结石形成机制的关系提供了新的研究角度和方向。 | ||
| 搜索关键词： | 利用 实时 荧光 pcr 技术 检测 胆囊结石 中华 吸虫 dna 方法 | ||
【主权项】：
一种利用实时荧光PCR技术检测胆囊结石中华支睾吸虫DNA的方法，其特征在于包括以下步骤：1)胆囊结石预处理；2)提取胆囊结石中的DNA；3)设计并合成特异性引物及探针：根据华支睾吸虫线粒体细胞色素C氧化酶亚基I基因序列，设计并合成如下特异性的引物及探针：正向引物序列：5′‑GGTTTGGTATGATTAGTCACATTTG‑3′；反向引物序列：5′‑ACCACCCTACCCAGACAAAC‑3′；探针序列：5′‑(JOE)‑AGCAAACATAGCCAACACCAAGCCC‑(BHQ‑1)‑3′；将以上引物及探针配制成浓度为10μM的储存液，‑20℃保存；4)实时荧光PCR反应。
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