[发明专利]获得可溶性克隆表达的斑马鱼肌酸激酶蛋白方法

摘要

本发明公开了一种获得可溶性克隆表达的斑马鱼肌酸激酶蛋白方法，依次包括以下步骤：1)、在导入ckmt2基因的大肠杆菌的菌液中加入IPTG至IPTG的终浓度为0.9～1.1mM；摇床培养；菌液的OD600nm为0.4～0.6；2)、将步骤1)的所得菌液先离心，弃上清，所得的沉淀中先加入PBS重悬，重悬后再加入溶菌酶，使溶菌酶的终浓度为180～220μg/mL；3)、先将上述步骤的所得物于36.5～37.5℃处理8～12min，然后于液氮中冰冻38～42秒；再于室温中自然解冻至液态；4)、重复上述步骤3)2次；5)、将步骤4)的所得物先离心，取上清，上清中含有可溶性的斑马鱼肌酸激酶融合蛋白。

主权项

获得可溶性克隆表达的斑马鱼肌酸激酶蛋白方法，其特征是依次包括以下步骤：1)、在导入ckmt2基因的大肠杆菌的菌液中加入IPTG至IPTG的终浓度为0.9～1.1mM；220rpm、36.5～37.5℃培养摇床振荡继续培养4.5～5.5小时；所述菌液的OD600nm为0.4～0.6；2)、将步骤1)的所得菌液先于11000g～13000g离心9～11min，弃上清，所得的沉淀中先加入PBS重悬，重悬后再加入溶菌酶，使溶菌酶的终浓度为180～220μg/mL；3)、先将上述步骤的所得物于36.5～37.5℃处理8～12min，然后于液氮中冰冻38～42秒；再于室温中自然解冻至液态；4)、重复上述步骤3)2次；5)、将步骤4)的所得物先于11000g～13000g离心9～11min，取上清，所述上清中含有可溶性的斑马鱼肌酸激酶融合蛋白。