[发明专利]香蕉束顶病毒的实时PCR快速检测方法

摘要

本发明属于生物技术领域，公开了一种检测香蕉束顶病毒的基于Taqman探针的实时PCR(Real-time PCR)检测方法。其特征在于(1)快速制备检测样品；(2)实时PCR扩增，获得结果。本发明的目的是为了克服现有技术中的不足之处，提供一种方法简单，能检出无明显感病症状的香蕉植株中的病毒；也能检出传毒介质-香蕉交脉蚜(Pentalonia nigronervosa)是否带毒；本发明有效减少了样品交叉污染，检测效率高且准确。

主权项

一种用于检测香蕉束顶病毒的实时PCR扩增引物和探针，其特征在于：根据GenBank公布的香蕉BBTV外壳蛋白基因(CP，BBTV component 3)序列(Accession number：AY534140)，从中选择保守序列设计引物F1和R1；并利用Primer express(1.0，PEApplied Biosystem)设计TaqMan探针，探针位于上下游引物之间，探针的5′端标记荧光素FAM，3′标记荧光素TAMRA，其中F1的序列为5’ACCAGCCGACT(a)ACA(c)TGTCTG 3’，R1的序列为5’TCCTCAACACGGTTGTCTTC 3’，TaqMan探针的序列为5’ACATTCAACATCTGATGTCCCTGTTGC  3’。