[发明专利]一种增加读长的测序方法

摘要

本发明涉及基因工程领域，提供了一种增加读长的测序方法。本发明所述增加读长的测序方法，首先使用连接测序法读取带有酶切识别位点的anchor延伸末端后M个以内的核苷酸序列信息，巧妙利用切刻内切酶识别anchor所带的酶切识别位点并进行酶切，在anchor延伸末端后保留N个以内的核苷酸，将之前已经读取过的相应数量的核苷酸位置封闭，然后在保留的核苷酸之后再连接检测用的荧光探针，读取后续位置的核苷酸序列信息，从而实现增加读长的目的。同时，利用切刻内切酶控制酶切之后所保留的核苷酸个数，能够保证连接酶的高保真度，进而保证后续核苷酸序列信息的读取准确率。

主权项

一种增加读长的测序方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：A.将第一anchor结合于待测核酸片段的接头上，该第一anchor带有酶切识别位点；B.在第一anchor延伸末端连接荧光探针，检测其荧光信号，更换荧光探针并重复连接和检测操作，得到延伸末端后M个核苷酸序列信息；C.利用酶切识别位点，以切刻内切酶进行酶切，得到在第一anchor延伸末端后保留N个核苷酸的酶切产物；D.将酶切产物与荧光探针连接，检测其荧光信号，更换荧光探针并重复连接和检测操作，得到第M+1至N+K位的核苷酸序列信息；其中，M、N、K均为正整数。