[发明专利]一种诱导铁皮石斛试管开花的方法

摘要

本发明涉及一种铁皮石斛试管开花方法，属于农业植物生物技术领域。该方法包括以下步骤：采用铁皮石斛茎段离体培养的原球茎为试验材料，进行壮苗培养50-80d；再经过诱导开花阶段I--诱导开花阶段II--诱导开花阶段I的交替培养诱导后，进入开花培养阶段。本发明的诱导铁皮石斛开花的方法，可以准确有效地诱导铁皮石斛花芽的形成，以及调控铁皮石斛试管开花率；本发明的方法可诱导健壮植株，花型大，其开花诱导率为90.5%-96.7%，花器官完整的花朵高达98.5%-100%。

主权项

一种铁皮石斛试管开花的方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤：（1）壮苗培养阶段：采用铁皮石斛茎段离体培养的原球茎为试验材料，以1/2 MS为基本培养基，蔗糖3%,添加NAA0.5‑1.0 mg/L 和 6‑BA 1.5‑2.5 mg/L，采用LED光源，在光照强度35－55μmol.m‑2.s‑1，波长600～690 nm，光照时间12 ‑16 h/d，培养温度25±2℃的条件下进行壮苗培养 50‑80 d；（2）诱导开花阶段I：培养基I为：1/2 MS基本培养基+PP333 0.50－1.50 mg/L+ABA 0.5‑1.0 mg/L，另在培养基I中附加体积比为10%‑20%的香蕉汁、0.1%‑0.5%活性炭, 采用LED光源，在光照强度50－75μmol.m‑2.s‑1，波长600～690 nm，培养温度26±2℃的条件下，培养20‑30 d；（3）诱导开花阶段II：诱导开花阶段I完成后，进入诱导开花阶段II，培养基II为： 1/2 MS基本培养基+TDZ 0.05‑1.00 mg/L + 6‑BA 0.5‑1.0 mg/L, 另在培养基II中附加体积比为10%‑20%的香蕉汁、0.1%‑0.5%活性炭，采用LED光源，在光照强度50－75μmol.m‑2.s‑1，波长490～590 nm，培养温度15±2℃的条件下，培养20‑30d，进入诱导开花阶段I；其中1/2 MS，指的是大量元素减半，其余含量不变；    通过上述（2）与（3）即：诱导开花阶段I‑‑诱导开花阶段II‑‑诱导开花阶段I的交替培养诱导后，进入开花培养阶段；（4）开花培养阶段：以MS为基本培养基，添加6‑BA 0.5‑1.5 mg/L和马铃薯100‑200 g/L，采用LED光源，在光照强度65－85μmol.m‑2.s‑1，光照时间12 ‑16 h/d，波长600～690 nm，培养温度26±2℃的条件下进行开花培养。