[发明专利]一种快速获得三倍体枇杷的方法

摘要

一种快速获得三倍体枇杷的方法，通过将枇杷种子催芽、取尖用8-羟基喹啉水溶液避光浸泡处理、卡诺氏固定液浸泡处理、纤维素酶与果胶酶混合酶液浸泡处理、卡诺氏固定液固定后，涂抹于载玻片上，显微镜检查染色体数目，确定根尖对应的三倍体种子。利用本发明方法筛选得到的三倍体数量多，比例大，平均达到0.406％，且不需要特殊的仪器设备，操作简单，容易掌握，工作效率较高，大大提高了枇杷三倍体育种的效率。该发明具有快速（当天即可确定三倍体种子）、高效和一步获得大量三倍体枇杷的优点。

主权项

一种快速获得三倍体枇杷的方法，其特征在于依次通过以下步骤实现：(1)收集枇杷种子，于20℃恒温萌发催芽；(2)待枇杷根长至1‑2厘米时，取根尖用浓度为0.002摩尔/升的8‑羟基喹啉水溶液避光浸泡处理3小时，播种取了根尖的种子；(3)处理后的根尖用卡诺氏固定液浸泡处理2‑24小时，卡诺氏固定液为甲醇：冰醋酸体积比=3:1的混合液；(4) 切取1‑2毫米根尖，用蒸馏水清洗后，用浓度均为0.03克/毫升的纤维素酶与果胶酶混合酶液浸泡处理3小时；(5)根尖用蒸馏水浸泡10分钟，然后用卡诺氏固定液固定，卡诺氏固定液为甲醇：冰醋酸体积比=3:1的混合液；(6)将固定好的根尖均匀涂抹在载玻片上，用磷酸缓冲液稀释的体积比浓度为5%的Giemsa染色液染色，显微镜检查染色体数目，确定根尖对应的三倍体种子；磷酸缓冲液为0.01克/毫升的磷酸氢二钠溶液：0.01克/毫升的磷酸二氢钾溶液体积比=6：4的混合液；(7)将三倍体种子进行常规栽培管理，即得到三倍体枇杷植株。