[发明专利]一种大木枣叶柄多倍体诱导方法

摘要

本发明公开了一种大木枣叶柄多倍体诱导方法，包括以下步骤：①将大木枣无根试管苗接种在枣树生长培养基上，在散光照射下先培养7d，然后在光照14h/d、光照强度为1500lx±200lx、相对湿度70％±5％的条件下培养25d；②取其顶端向下完全展开的三片带叶柄的叶子接种在含秋水仙碱10-50mg/L的枣树生长培养基中；于培养10d-30d后转移到不含秋水仙碱的枣树生长培养基上，等待形成新的芽体；③等新芽体形成后按照单个芽体接种在原枣树生长培养基上。本发明以大木枣叶柄为外植体，利用组织培养和秋水仙碱诱变相结合的方式，来诱导染色体加倍，同时一步分化获得大木枣是四倍体植株。

主权项

一种大木枣叶柄多倍体诱导方法，其特征在于，包括以下步骤：①将大木枣无根试管苗接种在枣树生长培养基上，在散光照射下先培养7d，然后在光照14h/d、光照强度为1500lx±200lx、相对湿度70％±5％的条件下培养25d；②取其顶端向下完全展开的三片带叶柄的叶子接种在含秋水仙碱10‑50mg/L的枣树生长培养基中；于培养10d‑30d后转移到不含秋水仙碱的枣树生长培养基上，等待形成新的芽体；③等新芽体形成后按照单个芽体接种在原枣树生长培养基上，采取由表及里的方法来筛选多倍体，与原种大木枣试管苗作对比，具体为先观察新生苗的叶片是否变得皱褶、节间是否变粗；然后选取发生变异的叶片观察气孔数量是否发生变化，对发生变化的植株再进行染色体观察来确定变异植株；所述枣树生长培养基为：氯化钙330mg/L，硝酸氨1400mg/L，硝酸钾1600mg/L，硫酸镁300mg/L，磷酸二氢钾185mg/L，硫酸亚铁29mg/L，己二胺四乙酸二钠40mg/L，硼酸12mg/L，硫酸锰120.0mg/L，硫酸锌11.0mg/L，钼酸钠0.30mg/L，硫酸铜0.030mg/L，盐酸硫胺素1.2mg/L，盐酸毗哆辛0.6mg/L，烟酸0.6mg/L，肌醇100mg/L，氨基己酸2.0mg/L，蔗糖30g/L，琼脂5.5g/L，6‑卞氨基腺嘌呤1.5mg/L，噬苯隆0.01mg/L，3‑吲哚乙酸0.2mg/L，pH＝5.8。