[发明专利]鹅VIP基因cDNA、DNA和PHI编码序列克隆的方法无效
| 申请号： | 201210071270.2 | 申请日： | 2012-03-19 |
| 公开（公告）号： | CN102604933A | 公开（公告）日： | 2012-07-25 |
| 发明（设计）人： | 何大乾;刘毅;王惠影;吴斌;吴华莉 | 申请（专利权）人： | 上海市农业科学院 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 201106 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种鹅VIP基因cDNA、DNA和PHI编码序列克隆的方法，用于扩展鹅VIP基因编码区部分序列的特异性引物为VIP1/VIP2，扩增鹅VIP基因cDNA5′序列的特异性巢式引物为GSP2和GSP3，3′端的特异性引物为GSP1，将测序的片段拼接，获得鹅VIP基因cDNA全长序列；用所获得的鹅VIP基因cDNA序列作为模板，设计扩增鹅VIP基因DNA序列的引物，首先筛选到VIP5/VIP6和VIP7/VIP8特异性引物，扩增出鹅VIP基因DNA两个片段，然后根据鹅VIP基因cDNA序列和所获得的DNA片段设计出VIP3/VIP4引物；结合鹅DNA中PHI样编码序列和cDNA序列，用Primer premier5.0设计两对鹅PHI编码特异性引物PHI1/PHI2和PHI3/PHI4，用PHI特异性引物扩增鹅PHI编码序列。采用上述方案，本发明首次获得鹅VIP基因序列和其cDNA序列。 | ||
| 搜索关键词： | vip 基因 cdna dna phi 编码 序列 克隆 方法 | ||
【主权项】：
一种鹅VIP基因cDNA、DNA和PHI编码序列克隆的方法，其特征在于，用于扩展鹅VIP基因编码区部分序列的特异性引物为VIP1/VIP2，扩增鹅VIP基因cDNA5′序列的特异性巢式引物为GSP2和GSP3，3′端的特异性引物为GSP1，将测序的片段拼接，获得鹅VIP基因cDNA全长序列；用所获得的鹅VIP基因cDNA序列作为模板，设计扩增鹅VIP基因DNA序列的引物，首先筛选到VIP5/VIP6和VIP7/VIP8特异性引物，扩增出鹅VIP基因DNA两个片段，然后根据鹅VIP基因cDNA序列和所获得的DNA片段设计出VIP3/VIP4引物；结合鹅DNA中PHI样编码序列和cDNA序列，用Primer premier 5.0设计两对鹅PHI编码特异性引物PHI1/PHI2和PHI3/PHI4，用PHI特异性引物扩增鹅PHI编码序列。
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