[发明专利]一种含有人参皂苷类成分药材及制剂指纹图谱的建立方法

摘要

本发明提供一种含有人参皂苷类成分药材及制剂指纹图谱的建立方法，涉及西洋参、西洋参茎叶药材、及西洋参、西洋参茎叶提取物制剂的超高效液相色谱法指纹图谱的构建方法和标准指纹图谱，本发明得到的指纹图谱可用于在整体上控制上述药材以及从上述药材中提取得到的皂苷提取物及其提取物制剂的质量，所述制剂包括固体制剂和液体制剂，如注射剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂、饮料、合剂和口服液等。

主权项

一种含有人参皂苷类成分药材及其提取物制成的制剂指纹图谱的建立方法，具体包括如下步骤：1）供试品溶液的制备：称取待测药材0.1~2 g，加氯仿0~100 ml，加热回流0~3小时，弃去氯仿液，药渣挥尽氯仿，20‑100 ml水或甲醇或正丁醇提取后，挥尽溶剂，加水5~50 ml使溶解，加石油醚（30~60℃）5~50 ml提取1‑4次，弃去石油醚液，水液通过大孔吸附树脂柱，以水50~100 ml、20%乙醇50~100 ml和70%~80%乙醇70~200 ml顺序洗脱，收集70%~80%乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇溶解，置5~50 ml容量瓶中定容，滤膜过滤，即得供试品溶液；2）参照物溶液的制备：分别取人参皂苷Re、拟人参皂苷F11、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rb3、人参皂苷Rd中的一种或多种，用甲醇溶解，制成每1 ml含包括人参皂苷Re、拟人参皂苷F11、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rb3、人参皂苷Rd中的一种或多种0.1~1.0 mg的溶液，滤膜过滤，作为参照物溶液；3）色谱条件：采用超高效液相色谱仪和蒸发光散射检测器联用技术（简称：UPLC‑ELSD），以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，色谱柱填料粒径1.5 μm~3.5 μm，柱温20~60 ℃；流动相：以乙腈为流动相A，以水为流动相B，梯度洗脱，梯度如下；其中0分钟~8分钟时，流动相A为19%~20%的乙腈、流动相B为81%~80%的水；8分钟~9分钟时，流动相A为20%~24%的乙腈、流动相B为80%~76%的水；9分钟~19分钟时，流动相A为24%~31%的乙腈、流动相B为76‑69%的水；19分钟~21分钟时，流动相A为31%~35%的乙腈、流动相B为69%~65%的水；21分钟~23分钟时，流动相A为35~36%的乙腈、流动相B为65~64%的水；23分钟~25分钟时，流动相A为36~40%的乙腈、流动相B为64~60%的水；25分钟~28分钟时，流动相A为40~55%的乙腈、流动相B为60~45%的水；28分钟~28.5分钟时，流动相A为55~19%的乙腈、流动相B为45~81%的水；28.5分钟~33分钟时，流动相A为19%的乙腈、流动相B为81%的水；流速：0.2~2.0 mL·min–1；漂移管温度：30~60 ℃，气体压力：2.5~4.0 bar；进样量为 1~20 μL；时间：5~60 min；4）测定：吸取供试品溶液1~20 μL注入超高效液相色谱仪，照高效液相色谱法测定，得到指纹图谱。