[发明专利]一种宽温淀粉酶的生产方法

摘要

一种宽温淀粉酶的生产方法，属于生物工程技术领域。本发明菌种为地衣芽孢杆菌（Bacilluslicheniformis）BL-mut08，已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号CCTCCNO.M207193，在中国专利200810020635.2已公开。通过对原有地衣芽孢杆菌系统的复合诱变，保藏、复壮，及选育方法，经过培养基配方优化及发酵工艺条件优化，建立了生产宽温淀粉酶的方法，生产出淀粉酶具有较宽范围的作用温度和很高的耐热性。该菌株于37℃、培养72小时左右达到产酶高峰。发酵液经絮凝处理，压滤，超滤浓缩得到浓缩酶液或通过其他后加工方式得到不同的淀粉酶制剂，如微丸，颗粒或粉剂。该酶制剂可广泛用于食品、医药行业，特别如酒精发酵、味精、抗生素等行业以及纺织、造纸工业。

主权项

一种宽温淀粉酶的生产方法，其特征在于，采用地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）BL‑mut08为出发菌株，地衣芽孢杆菌BL‑mut08即CCTCC NO.M207193，经过种子培养和二级液体发酵培养，后处理以后得到宽温淀粉酶，后处理过程为：板框过滤，滤液用截留分子量为10000的中空纤维管式超滤膜浓缩至产品要求活力单位；（1）斜面培养斜面培养基，以g/L计：牛肉汁3‑6，蛋白胨 5‑15，酵母粉或酵母膏1‑5，NaCl 1‑5，淀粉 5‑15，葡萄糖20‑80，琼脂 15‑25，以去离子水配制；培养温度 30‑40℃，培养时间20‑40h；（2）摇瓶培养摇瓶培养基，以g/L计：豆饼粉 20‑50，棉籽饼粉20‑50，(NH4)2SO4 1‑10，CaCl2 0.2‑1.0，玉米浆 15‑40，乳糖100‑200，柠檬酸钠 1‑10，磷酸氢二钾10‑20，磷酸二氢钾5‑10，以去离子水配制；培养温度30‑42℃，培养时间 20‑40h；（3）种子罐培养种子罐培养基，以g/L计：葡萄糖50‑100，酵母粉10‑50，棉籽饼粉5‑20，硫酸铵2‑6，柠檬酸钠 2‑10，CaCl2 0.2‑0.9，聚醚消泡剂P.P.E. 0.2‑0.8，磷酸氢二钾4‑10，磷酸二氢钾1‑10，以去离子水配制；发酵温度30‑40℃，通风量0.2‑1.0 V.V.M，罐压0.2~1.0 kg/cm2，培养时间：20‑40小时；（4）生产罐发酵发酵培养基，以g/L计：葡萄糖50‑100，酵母粉10‑50，棉籽饼粉5‑20，硫酸铵2‑6，柠檬酸钠2‑10，CaCl2 0.2‑0.9，玉米浆 15‑50，聚醚消泡剂P.P.E. 0.2‑0.8，磷酸氢二钾4‑10，磷酸二氢钾1‑10，以去离子水配制；发酵温度30℃‑40℃，通风量0.2‑1.0 V.V.M，罐压0.2~1.0 kg/cm2，发酵时间40‑80小时；（5）后处理：液态发酵后经过絮凝，加入防腐剂，压滤，滤液用截留分子量为10000的中空纤维管式超滤膜浓缩，收集浓缩液，即得宽温淀粉酶溶液。