[发明专利]五节芒多倍体诱导方法

摘要

本发明公开了一种五节芒多倍体诱导方法，以五节芒的种子为外植体，诱导获得胚性愈伤组织之后，对带芽点的愈伤组织进行多倍体诱变，0.1％秋水仙素处理愈伤组织72h左右，可诱导获得四倍体再生植株，低浓度的秋水仙素不能产生加倍效应，高浓度会导致愈伤组织死亡或严重抑制愈伤组织再生能力。本发明提出的五节芒多倍体诱导方法，利用五节芒种子为外植体，取材不受季节限制，通过愈伤诱导，秋水仙素诱变，愈伤组织分化成苗，经过鉴定，最终得到多倍体材料，周期2-3个月，与常规育种相比，诱变时间大大缩短，为五节芒新品种选育提供了一条新途径。

主权项

五节芒多倍体诱导方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：1)外植体的选择与灭菌：选用五节芒种子，在无菌操作台上用70％酒精处理，再用0.1％的升汞消毒，最后用无菌水冲洗备用；2)胚性愈伤组织的诱导和分化：将灭菌处理后种子，在超净台接种在愈伤组织诱导培养基：MS+2‑5mg/L2，4‑D；暗培养，保持温度24±2℃诱导愈伤组织，然后将愈伤组织接种在分化培养基MS+1‑2mg/L6‑BA中，分化条件为温度24±2℃，光照2000lux；3)秋水仙素的处理：将秋水仙素过滤灭菌，将分化后带芽点的愈伤组织接种于添加质量百分比为0.05％‑0.2％的秋水仙素的基本培养基中，处理24h‑72h；4)丛生芽诱导或增殖：将材料从秋水仙素处理培养基中取出，无菌水清洗，用灭菌过的滤纸吸干残留水分；转入分化增殖生根培养基MS+2mg/L6‑BA+0.2mg/LIAA中，使其分化增殖成苗。