[发明专利]H9N2亚型禽流感病毒标准样品的制备方法无效
申请号: | 201210082755.1 | 申请日: | 2012-03-27 |
公开(公告)号: | CN102634488A | 公开(公告)日: | 2012-08-15 |
发明(设计)人: | 杜雄伟;李叶 | 申请(专利权)人: | 大连民族学院 |
主分类号: | C12N7/00 | 分类号: | C12N7/00 |
代理公司: | 大连非凡专利事务所 21220 | 代理人: | 闪红霞 |
地址: | 116000 辽*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | 本发明公开一种H9N2亚型禽流感病毒标准样品的制备方法,按如下步骤进行:a.将H9N2亚型禽流感病毒株用生理盐水作10倍连续稀释至10-8,每个稀释度接种5枚10日龄SPF鸡胚,每胚0.1ml,接种后置于37℃继续孵育,每日照蛋;b.逐个收获接种72~120h死亡鸡胚及120h活胚的尿囊液,分别测定每个鸡胚尿囊液的HA价,并以最高稀释度病毒感染的一枚鸡胚中的尿囊液作为传代接种物;c.依次重复a、b步骤两次,重复过程中a步骤的H9N2亚型禽流感病毒株为b步骤所产生的传代接种物;d.将最后一次b步骤所产生的传代接种物用生理盐水作10倍稀释,10倍稀释液接种于10枚10~11日龄SPF鸡胚的尿囊腔内,接种后继续孵育,每日照蛋,收获接种72~120h死亡鸡胚尿囊液,分装安瓿,-80℃温度保存。 | ||
搜索关键词: | h9n2 禽流感 病毒 标准 样品 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种H9N2亚型禽流感病毒标准样品的制备方法,其特征在于按如下步骤进行:a. 将H9N2亚型禽流感病毒株用生理盐水作10倍连续稀释至10‑8,每个稀释度接种5枚10日龄SPF鸡胚,每胚0.1 ml,接种后置于37℃继续孵育,每日照蛋;b. 逐个收获接种72~120h死亡鸡胚及120 h活胚的尿囊液,分别测定每个鸡胚尿囊液的HA价,并以最高稀释度病毒感染的一枚鸡胚中的尿囊液作为传代接种物;c. 依次重复a、b步骤两次,重复过程中a步骤的H9N2亚型禽流感病毒株为b步骤所产生的传代接种物;d. 将最后一次b步骤所产生的传代接种物用生理盐水作10倍稀释,将10倍稀释液接种于10枚10~11日龄SPF鸡胚的尿囊腔内,接种后继续孵育,每日照蛋,收获接种72~120 h死亡鸡胚尿囊液,分装安瓿,‑80℃温度保存。
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