[发明专利]一种分离培养肝脏原代细胞的方法有效
| 申请号： | 201210083696.X | 申请日： | 2012-03-27 |
| 公开（公告）号： | CN102634480A | 公开（公告）日： | 2012-08-15 |
| 发明（设计）人： | 方美英;董新星;陈刚;白莹;陈洁 | 申请（专利权）人： | 中国农业大学 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 王朋飞;王加岭 |
| 地址： | 100193 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明提供一种分离培养肝脏原代细胞的方法，包括以下步骤：1)从肝脏的肝门静脉输入灌流液；2)输入胶原酶灌流液；3)将消化成熟的肝脏浸泡于胶原酶灌流液中；4)加清洗液终止消化，过滤，收集肝细胞悬液；5)离心，弃上清，用完全培养基重悬，培养。本发明方法操作简单，成本低，稳定高效，肝细胞得率高，活力高，易贴壁。此法可在实验室推广，成为科学研究的常规方法。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 分离 培养 肝脏 细胞 方法 | ||
【主权项】：
一种分离培养肝脏原代细胞的方法，包含以下步骤：1)从离体肝脏的肝门静脉输入灌流液，所述的灌流液，其1L配方为：NaCl 8‑9.4g，KCl 0.2‑0.4，HEPES 2.4‑4.8g，双蒸水定容至1L，pH值7.2‑7.4；2)输入胶原酶灌流液，肝组织呈龟背状裂开后，停止灌流；3)将消化成熟的肝脏浸泡于胶原酶灌流液中；4)加清洗液终止消化，过滤，收集肝细胞悬液；5)离心，弃上清，用完全培养基重悬培养。
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