[发明专利]一种多酶协同提高玉米秸秆酶解产糖量的方法

摘要

本发明公开一种多酶协同提高玉米秸秆酶解产糖量的方法，具体涉及一种麦芽酶协同纤维素酶提高高温热水预处理玉米秸秆酶解产糖率的方法。它以高温热水预处理后玉米秸秆不溶性固体为底物，加入一定量纤维素酶和从大麦种子发芽中提取的麦芽酶，补加一定量HAC-NaAC缓冲液，置于一定温度下进行酶解。当麦芽酶和纤维素酶，以不同的比例混合后，协同作用下酶解底物，于50℃水浴中酶解不同的时间，以获得最大葡萄糖产率，因此，本发明在产糖量相同的情况下，大大减少了纤维素酶的用量，降低酶解成本。解决了玉米秸秆类生物质酶解时纤维素酶用量大，酶解效率低的问题。在玉米秸秆的生物转化方面有很好的应用前景。

主权项

一种多酶协同提高玉米秸秆酶解产糖量的方法，其特征在于，操作步骤包括：①纤维素酶液的制备：用pH4.8的HAC‑NaAC缓冲液稀释纤维素酶，配制纤维素酶液；②麦芽酶液的制备：取大麦种子，采用浸四断八工艺浸麦，然后干燥、粉碎，按照每10g粉碎好的种子加100mL的10倍稀释的pH4.8HAC‑NaAC缓冲液的比例混合；于40℃水浴、搅拌1h；再4000r/min离心15min，取上清液备用；其中，所述的浸四断八工艺是指，湿浸4h，干浸8h，浸麦度达到45％；总浸种子时间为48h，发芽时间为120h；培养温度为16℃；③玉米秸秆的处理：玉米秸秆粉碎至40‑60目；再按固液比1g∶20ml，向玉米秸秆中加入蒸馏水，混合均匀后，于190℃保温20min；过滤得到不溶性固体，蒸馏水洗到中性后，密封备用；④酶解实验：按下述比例称取酶解反应物并进行酶解反应：称取1g步骤③制备的玉米秸秆粉作为反应底物，加入5mL步骤②制备的麦芽酶液，再按酶用量为4～24IU/g底物的比例加入步骤①制备的纤维素酶液，混合均匀后，用pH4.8的HAC‑NaAC缓冲液补充至总体积50mL；于50℃恒温水浴中振荡酶解1～72h。