[发明专利]一种野山参快速繁殖的方法

摘要

本发明公开了一种野山参快速繁殖的方法，主要通过对愈伤组织诱导及芽分化、继代培养、增殖培养、生根培养以及炼苗移栽的步骤，达到了增殖速度快、遗传性状稳定、繁殖系数高、试管苗生长旺盛的优良效果，经过上述步骤的培养，野山参的愈伤组织的萌动率达到了95%，增殖倍数达到了4.8倍，生根率达到了96%，最终的成活率达到了98%，并且质量得到了较好的保证。

主权项

一种野山参快速繁殖的方法，其特征在于，包括：（1）外植体的选择及消毒：于6～7月将生长健壮的野人参的叶柄切下；用流水冲洗20分钟后用紫外灯照射5min，转入超净工作台，在超净工作台上先用70%的乙醇浸泡20‑30秒，然后用无菌水冲洗，再转入滴加了2～3滴土温80的0.1%的升汞溶液中浸泡3‑4min，用无菌水冲洗3～4次，最后在无菌条件下分割材料，叶柄切割成0.3～0.4cm长；（2）愈伤组织诱导及芽分化：将步骤（1）所述的外植体接种到愈伤组织诱导培养基中，PH6.0，培养温度为20℃，光照周期13h/d，光强度为2200lux，培养30天左右可见愈伤组织的形成，所述愈伤组织诱导培养基为MS+蔗糖35g/L+琼脂6.0g/L+2.4D1.1mg/L+6‑BA 0.3mg/L+IAA 1.6mg/L；（3）继代培养：将初代培养的外植体新芽剪下接种在继代培养基上，培养条件与步骤（2）相同，所述继代培养基是1/2MS+蔗糖35g/L+琼脂6.0g/L+6‑BA0.3mg/L+ IBA2.3mg/L+KT0.6mg/L，PH 6.0，30d左右将诱导的丛生芽分离；（4）生根培养：将其中生长健壮、长势良好的野山参小苗转接至生根培养基，其余的单芽再进行继代培养，所述生根培养基是3/4MS+蔗糖35g/L+琼脂6.0g/L+IAA 0.6mg/L+ PP333 0.3mg/L +KT 0.3mg/L，培养条件与步骤（2）相同；（5）炼苗移栽：先将培养瓶移至温室，自然条件下炼苗4d，然后解开封口膜，炼苗6d，炼苗期间适当遮光，使光照强度为自然光的35%，炼苗完成后取出小苗洗净根部附着的培养基，移栽到经消毒的基质中，温度控制在22‑24℃，前7d湿度控制在70%左右，以后逐渐降低湿度，直至将移栽苗置于自然条件下。