[发明专利]一种猪精液冷冻保存方法

摘要

本发明提供了一种以含谷胱甘肽的冷冻保存液进行猪精液冷冻保存的方法。所述的冷冻保存液以常规适用于猪精液冷冻保存的稀释液为基质，还添加有2～6mg/mL的谷胱甘肽，5～11mg/mL的乳糖和10～30％(v/v)卵黄、5～10％(v/v)的甘油和0.5～2mg/mL的十二醇硫酸钠。本发明将谷胱甘肽应用于猪精液冷冻保存，可以有效地去除冷冻过程中产生的多余自由基，解决了目前猪精液冷冻保存存活率低的问题。其经济成本较低，便于在生产中推广应用。

主权项

1.一种猪精液冷冻保存方法，所述方法包括：(1)将新鲜采取的猪精液用等温的BTS稀释液稀释一倍；(2)在15℃条件下静置2小时，1000转离心10分钟；(3)离心后去除上清液，沉淀用含谷胱甘肽的猪精液冷冻稀释液稀释，使精子密度为2×10⁹个/mL，稀释后的精液在5℃条件下静置2小时后，再用5℃下保存的所述的猪精液冷冻保存液稀释一倍，使精子的最终密度为1×10⁹个/mL，得到稀释后的精液；所述含谷胱甘肽的猪精液冷冻稀释液每1000mL组成如下：谷胱甘肽    2～6g乳糖        50～110g卵黄        100～300mLBTS稀释液补足至1000mL；所述猪精液冷冻保存液每1000mL组成如下：BTS稀释液补足至1000mL；(4)将冷冻稀释后的精液装入冷冻管，置于液氮面上3厘米，熏蒸5分钟后，直接投入液氮中，冷冻保存备用。