[发明专利]一种基于表面等离子共振技术的塑料玩具中有害化合物检测方法

摘要

一种基于表面等离子共振技术的塑料玩具中有害化合物的检测方法，属于有害化合物残留检测技术领域。本发明包括传感表面适配体固定、样品标记、样品检测、传感元件再生四个步骤，利用同一传感芯片对不同有害化合物的残留量进行检测；其特征在于以凝血酶作为标记分子探针，将传感芯片表面连接凝血酶适配体；对样品进行一系列预处理，加入待测有害化合物的凝血酶标记物，混合后竞争结合金属纳米粒子修饰的有害化合物相应的适配体；利用表面等离子体共振检测仪检测凝血酶的含量，间接检测有害化合物；并对传感芯片进行再生，用于检测其它有害化合物。本发明为塑料玩具中有害化合物的检测提供了一种稳定性高、可重复性强、灵敏度高的通用检测方法，实现了同一表面等离子体共振传感芯片对不同有害化合物的检测，具有极高的通用性。

主权项

一种应用表面等离子体共振技术的塑料玩具中有害化合物的检测方法，利用同一传感芯片对不同有害化合物的残留量进行检测；其特征在于包括以下步骤：（一）传感芯片表面适配体固定：选择链霉亲和素SA修饰的传感芯片，通过通入5‑50μL浓度为1‑50μg/L已标记生物素的凝血酶适配体，在表面等离子体传感芯片上固定上凝血酶适配体；（二）对待测有害化合物进行凝血酶标记，标记方法根据待测物基团不同，选择EDC/NHS法交联羧基与氨基或戊二醛法交联两个氨基；（三）标准溶液配制：用0.01‑0.1mol/L（pH＝7.4）的磷酸盐缓冲液配置有害化合物的标准样品储备液，储备液浓度为0.1ng/mL至1mg/mL，用磷酸盐缓冲液将储备液配制成不同浓度的标准溶液，取不同浓度未标记待测化合物的标准溶液和凝血酶标记的待测有害化合物分充分混合后，竞争结合有害化合物相应的适配体或纳米粒子修饰的适配体，其中凝血酶标记的有害化合物应不少于加入的适配体量；（四）建立标准曲线：采用表面等离子共振谱仪测量，以0.02mol/L的磷酸盐缓冲液为测量基准，通过微泵通入5‑100μL待测混合样品，记录下表面等离子体共振仪光谱图，通过检测凝血酶的含量，间接检测有害化合物；取不同浓度待测样品的表面等离子体共振谱图稳定值，绘制工作曲线，并进行多项式曲线拟合，获得回归标准曲线；（五）定量检测：对于未知含量的有害化合物进行检测，同样按照步骤（三）进行；采用表面等离子体共振检测仪记录有害化合物的光谱图；将光谱图中残留组分的稳定值代入相应的回归曲线方程，计算出塑料玩具中有害化合物的浓度值；（六）通入0.01‑0.05mol/L（pH为2‑3）的甘氨酸‑盐酸缓冲溶液，冲洗传感芯片表面，进行传感元件再生，用于其它有害化合物检测。