[发明专利]解脲脲原体和微小脲原体的荧光定量检测方法有效
申请号: | 201210124339.3 | 申请日: | 2012-04-25 |
公开(公告)号: | CN103045721A | 公开(公告)日: | 2013-04-17 |
发明(设计)人: | 赵缜;刘璐;平亚芬 | 申请(专利权)人: | 上海国兴医疗器械有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/06;G01N21/64 |
代理公司: | 上海汉声知识产权代理有限公司 31236 | 代理人: | 郭国中 |
地址: | 200237 上海市闵*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明涉及一种解脲脲原体和微小脲原体的荧光定量检测方法,该方法包括:样品处理和DNA提取;将与解脲脲原体和微小脲原体拓扑异构酶IV DNA互补的寡核苷酸序列作为PCR反应中的正向引物、反向引物和荧光标记探针分别加入两个不同的PCR扩增管中,利用相同的扩增条件同时分别扩增上述两个扩增管中的解脲脲原体和微小脲原体的DNA靶序列;根据检测反应体系中不同荧光信号的变化,通过标准曲线来判断待测样品中是否含有解脲脲原体、微小脲原体,并确定其相应含量。对于解脲脲原体和微小脲原体的鉴定和定量分析,本发明提供的方法具有快速、灵敏、特异性高和成本低的特点。 | ||
搜索关键词: | 解脲脲 原体 微小 荧光 定量 检测 方法 | ||
【主权项】:
一种解脲脲原体和微小脲原体的荧光定量检测方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:步骤一,样本处理和DNA提取;步骤二,将与解脲脲原体的拓扑异构酶IV DNA互补的寡核苷酸序列作为PCR反应中的正向引物、反向引物和荧光标记探针加入一个PCR扩增管中;步骤三,将与微小脲原体的拓扑异构酶IV DNA互补的寡核苷酸序列作为PCR反应中的正向引物、反向引物和荧光标记探针加入另一个PCR扩增管中;步骤四,在相同的扩增条件下,同时分别扩增上述两个扩增管中所述解脲脲原体和所述微小脲原体的DNA靶序列;步骤五,检测所述反应体系中不同荧光信号的变化,通过标准曲线来判断待测样品中是否含有解脲脲原体、微小脲原体或混合感染,并确定其相应含量。
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