[发明专利]一种复杂基质水体样品中雌激素及壬基酚、辛基酚、双酚A的共检测方法

摘要

本发明涉及一种水环境中内分泌干扰物的检测技术，特别是涉及一种采用液相色谱-串联质谱联用技术对复杂基质水体样品中雌酮、17β-雌二醇、雌三醇、17α-乙炔基雌二醇、壬基酚、辛基酚和双酚A定量分析的技术。本方法将采集好的水体样品，采用HLB固相萃取小柱富集并用甲醇洗脱，再将洗脱液氮吹干，用Florisil净化，最后利用液相色谱-串联质谱联用分析。该方法环境友好、易于操作、且回收率较高，能够快速分析复杂基质水体样品中痕量存在的雌酮、17β-雌二醇、雌三醇、17α-乙炔基雌二醇、壬基酚、辛基酚和双酚A。

主权项

一种复杂基质水体样品中雌酮、17β‑雌二醇、雌三醇、17α‑乙炔基雌二醇、壬基酚、辛基酚和双酚A的共检测方法，其特征在于该方法包括如下步骤：(1)HLB柱富集水样采用GF/F玻璃纤维滤膜进行过滤，并用盐酸调节pH为3；利用固相萃取装置活化Waters公司的HLB固相萃取柱，活化的顺序为：5mL色谱纯乙酸乙酯、5mL色谱纯甲醇及10mL超纯水，流速为1mL/min；采用已活化的固相萃取柱对水样进行固相萃取富集，控制流速为3mL/min；富集完成后，首先用6mL 40％甲醇水溶液淋洗，再用6mL甲醇/氨/水溶液淋洗，所述甲醇/氨/水溶液v/v/v＝10/2/88；淋洗结束后真空抽干10min，然后用6mL甲醇洗脱，并将洗脱液氮吹干；(2)Florisil柱净化用6mL正己烷/二氯甲烷＝3/1(v/v)溶液重新溶解氮吹干后的残渣，然后通过预先用正己烷活化好的Waters公司的Florisil固相萃取柱，再用6mL正己烷/二氯甲烷＝3/1(v/v)淋洗，最后用6mL丙酮/二氯甲烷＝2/8(v/v)为洗脱剂进行洗脱，洗脱液用氮气吹干；残渣用0.5mL甲醇定容，漩涡混合后过0.22μm的尼龙滤头待测；(3)液相色谱‑串联质谱分析液相色谱‑串联质谱联用仪器为：Agilent 1100高效液相色谱系统，包括四元输液泵，美国Agilent公司的自动进样器；3200QTRAP型液相色谱/串联质谱仪，配有电喷雾离子化源(ESI)以及Analyst 1.4.1数据处理软件；色谱柱：Nova‑Pak C18，3.9mm×150mm×4μm，，Waters公司；离子源：电喷雾离子化源(ESI)，负离子方式检测；离子喷射电压：‑4500V；温度：450℃；源内气体1(GS1)，N2，压力：45psi；源内气体2(GS2)，N2，压力：45psi；气帘气体为N2，压力：20psi；扫描方式为多重反应监测(MRM)；碰撞气N2的压力为：Medium；HPLC流动相梯度洗脱条件如表1所示：表1  HPLC流动相梯度洗脱条件(4)标准曲线的绘制以外标法进行定量测定；(5)样品及回收率的测定采集待测污水处理厂水样，按步骤(1)对水样中的目标化合物进行富集，再按步骤(2)进行提取物的净化，然后用液相色谱‑串联质谱联用检测，并与步骤(4)得到的标准曲线比较，通过换算最终得到待测污水样品中雌酮、17β‑雌二醇、雌三醇、17α‑乙炔基雌二醇及壬基酚、辛基酚、双酚A的含量。