[发明专利]一种蛇足石杉孢子体试管扦插的方法

摘要

本发明公开了一种蛇足石杉孢子体试管扦插的方法，该方法以新鲜蛇足石杉孢子体顶芽为材料，用试管扦插的方式进行材料的繁殖和保存。方法简单易行，效率高，对于蛇足石杉的种质资源保存有着重要的意义，并能为各地实验室进行相关方面的研究提供鲜活的实验材料。

主权项

一种蛇足石杉孢子体试管扦插的方法，其特征在于，按以下步骤操作：（1）培养基质的准备将干燥水苔置于含3‑吲哚丁酸0.5mg/L~1mg/L的1/2MS培养液中充分吸水后，装入广口培养瓶中达1/3体积处，用封瓶膜将瓶口封住，于121℃下灭菌25min，晾凉备用；（2）材料的表面灭菌从野外采集蛇足石杉新鲜材料，经自来水冲洗干净，剪取顶芽6cm～8cm，超净工作台中先浸在质量分数为75%的乙醇溶液中30s～60s；然后置于浓度为0.1%的升汞（HgCl2）溶液中浸泡5min～8min，再用无菌水冲洗3次，作为扦插的材料；（3）孢子体的扦插培养将灭菌后的顶芽扦插在灭过菌的培养瓶中，培养温度为22±2℃、光照时间12/d～16/d条件下进行培养10周～12周，顶芽的下端生根，上端长出新的顶芽或发生分支；（4）孢子体的继代扩繁剪取步骤（3）中获得植株的顶芽，然后扦插于另一新的培养瓶中继续培养，而剩下的形态学下端接种于含细胞分裂素培养液的培养瓶中培养，培养条件与步骤（3）中的温度、光照时间相同，培养10周后，原来剪去顶芽的下端长出新的顶芽，而扦插的顶芽则能产生新的根并能生长或发生分支。