[发明专利]一种治疗增生性玻璃体视网膜病变的中药制剂的质量检测方法

摘要

本发明涉及一种治疗增生性玻璃体视网膜病变的中药制剂的质量检测方法，该制剂由水蛭、三棱、山楂、昆布、海藻五味中药组方，经提取加工制成复方中药制剂，该制剂具有活血化瘀、软坚散结、消积导滞的功能，用于痰瘀互结所致的增生性玻璃体视网膜病变，症见视物昏朦，眼前黑影遮挡，甚或视物不见，神膏混浊，视衣僵硬。本发明所提供的质量检测方法稳定可靠、操作简便，且准确度高，对水蛭、三棱、昆布、海藻和山楂进行了检测，保证了药品的安全性和有效性。

主权项

一种治疗增生性玻璃体视网膜病变的中药制剂的质量检测方法，其特征在于该质量检测方法包括鉴别和含量测定方法：鉴别：(1)取该中药制剂，置显微镜下观察：斜纹肌纤维多无色，散离或相互绞结，直径4～40μm，边缘多不平整，有的局部膨大；薄壁细胞呈类圆形或多角形、非木化，有稀疏纹孔及孔沟；或者：表皮细胞呈棕黄色，细胞界限不明显，布有暗棕色的色素颗粒，刚毛少见，常碎断散在，淡棕色或黄棕色，直径24～32μm，先端多钝圆，有的表面可见纵裂纹；淀粉粒甚多，单粒类圆形、类多角形或椭圆形，直径2～10μm，较大粒隐约可见点状或裂缝状脐点，分泌细胞内含红棕色分泌物，纤维多成束，壁较厚，微木化或木化，有稀疏单斜纹孔，木化薄壁细胞呈类长方形、长椭圆形或不规则形，壁呈连珠状，微木化；(2)取相当于生药材1.6～4.8g的该中药制剂，研细，加水25～75ml，浸泡数小时，滤过，滤液浓缩至约5～15ml，取浓缩液2～3ml，加硝酸1滴与硝酸银试液数滴，即生成黄色乳状沉淀，在氨试液中微溶解，在硝酸中不溶解；(3)取相当于生药材3.2～24g的该中药制剂，研细，加乙醇20～60ml，超声处理20～35分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液，另取水蛭对照药材1g，同法制成对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5～15μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷‑乙酸乙酯3～9∶0.1～2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的紫红色主斑点；365nm紫外光灯下显相同的橙红色荧光主斑点；(4)取相当于生药材3.2～16g的该中药制剂，研细，加乙醇15～45ml，超声处理20～35分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液，另取三棱对照药材2g，同法制成对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2～8μl，分别点于同硅胶G薄层板上，以60～90℃石油醚‑乙酸乙酯5～15∶2～4为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光主斑点；(5)取山楂对照药材1g，加水25～75ml，加热回流30分钟～2小时，滤过，滤液蒸至近干，残渣趁热加乙醇10～30ml，超声处理20～35分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取对照药材溶液及三棱鉴别项下的供试品溶液各5～15μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷‑甲醇‑甲酸15～20∶1～4∶0.1～0.5为展开剂，展开，取出，晾干，置254nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在 与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光主斑点；含量测定方法：色谱条件与系统适用性试验  以烷基反相键合硅胶为填充剂的SB‑Aq色谱柱；以甲醇用磷酸调节pH值至3.0的0.5％磷酸二氢铵溶液2～10∶80～97为流动相；流速为每分钟0.5ml；检测波长为210nm；理论板数按枸橼酸峰计算应不低于3000；对照品溶液的制备取枸橼酸对照品适量，精密称定，加水制成每1ml含0.8～2.0mg的溶液，即得；供试品溶液的制备  将该中药制剂研细，取约相当于生药材3.2～9.6g的该中药制剂，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加水50～150ml，密塞，称定重量，超声处理10～35分钟，功率为250W，频率为40kHz，放冷，再称定重量，用水补足减失的重量，摇匀，离心5～15分钟，每分钟4000转，精密吸取上清液25～75ml，通过阴离子交换树脂柱，用水25～75ml洗脱，弃去洗脱液，继用稀盐酸溶液洗脱，收集洗脱液60～180ml，水浴浓缩至适量，转移至25ml量瓶中并用水稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5～15μl，注入液相色谱仪，测定，即得；相当于生药材1.6g的该中药制剂含山楂以枸橼酸(C6H8O7)计，不得少于3～30mg；上述质量检测方法中所述的提取溶剂可以被药剂学上所述的一种或几种溶剂性质与之相同的溶剂或混合溶剂替换，替换后提取作用相同；上述质量检测方法中所述的展开剂可以被药剂学上所述的展开性质与之相同的展开剂替换，替换后展开作用相同；上述质量检测方法中所述的中药制剂由水蛭、三棱、山楂、昆布和海藻五味主药组成，采用药剂学常规技术制成任何一种药剂学上所述的剂型。