[发明专利]一种尿样中肌氨酸的定量检测方法

摘要

本发明涉及一种尿样中肌氨酸的定量检测方法，属化学定量分析领域，其步骤依次为：（1）用有机溶剂乙腈对尿样进行稀释处理，加入内标工作液肌氨酸-d3，混旋离心，弃沉淀，吸取上清液与乙腈混合，供分析测试；（2）以硅胶键合相填料为分析柱，流动相乙腈水溶液中加入甲酸和甲酸铵作为改性剂，使肌氨酸与其他干扰物质色谱分离；（3）采用电喷雾离子化串联质谱仪，在正离子检测模式下，检测肌氨酸；（4）结果计算：以获得的峰面积或峰高度，按同位素稀释内标法计算肌氨酸在尿样中的含量。本发明方法的特异性、灵敏度和准确性高，且成本低廉、简单快速，适用于临床上低成本、大批量尿样中肌氨酸定量检测的要求。

主权项

一种尿样中肌氨酸的定量检测方法，其特征在于：（1）尿样乙腈稀释：随机取100 μL尿样，加入20 μL浓度为50 μg/mL肌氨酸‑d3内标工作液，加入200 μL乙腈，混旋30s，15000 rpm离心3 min，弃沉淀，吸取100 μL上清液与300 μL乙腈混合，转移至进样瓶，供分析测试；（2）色谱分离：以硅胶键合相填料为分析柱，以水溶液为流动相A，乙腈溶液为流动相B，所述A相中含有0.02～0.4%甲酸和1～5mmol/L甲酸铵作为改性剂，流速为0.1～1 mL/min，等度洗脱或者梯度洗脱，将肌氨酸从分析柱上洗脱；（3）质谱检测：采用电喷雾离子源串联质谱仪，在正离子检测模式下，多反应监测扫描分析，检测肌氨酸；（4）结果计算：以质谱检测获得的肌氨酸峰面积或峰高度，按同位素稀释内标法计算肌氨酸在尿样中的含量。