[发明专利]一种利用山药带腋芽茎段组织培养方法

摘要

本发明公开了“一种利用山药带腋芽茎段组织培养方法”。选取山药带腋芽茎段作为外植体，经过芽的诱导、继代增殖、生根培养等一系列操作步骤，最后形成山药试管苗。此方法包括几个阶段培养基成分以及处理方法，仅20天左右就可以获得完整组培苗。本发明能够由带腋芽茎段外植体诱导获得山药组培苗，从而可以室内大量繁殖试管苗，实现山药种薯繁殖工厂化生产。本发明具有繁殖系数高、繁殖速度快、繁殖效率高，种苗病毒少、遗传稳定性好且不受环境条件的影响的特点。

主权项

一种利用山药带腋芽茎段组织培养方法，包括外植体的灭菌、芽的诱导分化和继代增殖、生根培养，其特征在于： （1）外植体的灭菌：取铁棍山药的嫩茎，去掉叶片，用剪刀截成2‑3cm带腋芽的茎段，流动水冲洗10min；在超净台上用75%酒精浸泡30s，用NaClO灭菌20min，无菌水漂洗5‑7次，切去末端留下1.5‑2cm的带腋芽茎段接种在MS培养基中；（2）芽的诱导分化：外植体经灭菌后接种在诱导培养基中，诱导为含0.5‑1mg·l‑1 6‑BA，0‑0.1mg·l‑1 NAA的MS培养基；（3）继代增殖：诱导培养基上萌发出的不定芽长到带两片或两片以上叶片的时候，切取单芽接种在继代增殖培养基中，继代增殖培养基为含1.5mg·l‑1 6‑BA，0mg·l‑1 NAA 的MS培养基；（4）生根培养：将高2.0 cm以上、带有2片叶的健壮小苗切下, 转入生根培养基上进行培养，生根培养基成分为含1.0mg·l‑1 6‑BA，0.2mg·l‑1 NAA，质量比为0.02%的活性炭的MS培养基。