[发明专利]一种活动性肺结核病特异的血清miRNAs的制备方法有效
申请号: | 201210171919.8 | 申请日: | 2012-05-30 |
公开(公告)号: | CN102732520A | 公开(公告)日: | 2012-10-17 |
发明(设计)人: | 李继承;张星 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12N15/10;C12Q1/68 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 310058 *** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了制备活动性肺结核病特异的血清miRNAs的方法,包括以下步骤:A1:活动性肺结核病患者和健康对照者血清样本的采集和临床检测;A2:提取血清样本的总RNA;A3:活动性肺结核病特异的血清miRNAs的高通量测序筛查;A4:设计miRNAs茎环反转录引物以及上游、下游引物,茎环反转录引物为SEQ ID NO:10-SEQ ID NO:18,通用的上游引物为SEQ ID NO:19,下游引物为SEQ ID NO:20-SEQ ID NO:28。本发明制备活动性肺结核病特异的血清miRNAs,利用高通量测序初步筛查差异表达的血清miRNAs,应用茎环方法设计特异性的反转录引物,进行荧光定量PCR方法验证得到差异表达的血清miRNAs,对研究控制肺结核病传播,降低肺结核病的发生率具有重要的意义。 | ||
搜索关键词: | 一种 活动性 肺结核病 特异 血清 mirnas 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种活动性肺结核病特异的血清miRNAs的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:A1:活动性肺结核病患者和健康对照者血清样本的采集和临床检测;A2:提取血清样本的总RNA;A3:活动性肺结核病特异的血清miRNAs的高通量测序筛查;A4:设计miRNAs茎环反转录引物以及上游、下游引物,茎环反转录引物为SEQ ID NO:10‑SEQ ID NO:18,通用的上游引物为SEQ ID NO:19,下游引物为SEQ ID NO:20‑SEQ ID NO:28;A5:荧光定量PCR验证活动性肺结核病特异的血清miRNAs。
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